Incorporación de L-Dopa en el extremo C-Terminal de a-tubulina.

DITAMO YANINA, BISIG GASTÓN; DENTESANO YANELA; CARLOS ARCE

Córdoba

Jornada; Jornadas 2016 de Posgrado; 2016

Facultad de Ciencias Químicas (UNC).

Previamente había sido descripto en nuestro laboratorio que L-Dopa puede ser incorporada in vitro en el extremo C-terminal de α-tubulina por acción de la ?Tubulina tirosina ligasa? (TTL). Luego de su incorporación, L-Dopa no puede ser liberada por la ?tubulina carboxipeptidasa? (TCP), la otra enzima involucrada en el ciclo de tirosinación/detirosinación. Para monitorear la cantidad de L-Dopa incorporada en α-tubulina, usamos un método basado en el estado de tirosinación (% de tubulina tirosinada, % de tubulina detirosinada con respecto a la total) en muestras antes y luego de la incorporación de L-Dopa. Ahora, nosotros reportamos que L-Dopa puede incorporarse en tubulina de cultivos celulares en ausencia de síntesis de novo de proteínas; es decir de manera postraduccional. Además, una vez ocurrida la incorporación, L-Dopa no puede ser removida por la subsiguiente incubación de los cultivos celulares en medios enriquecidos en tirosina. Esto sugiere que L-Dopa se une irreversiblemente al C-terminal de α-tubulina; bloqueando la posterior incorporación de tirosina.