Desarrollo embrionario de la retina de pollo. Ontogenia de factores de transcripci¨®n, opsinas, y factores regulatorios de las cascadas de fototransducci¨®n

VERRA DANIELA M.; CONTÍN MARÍA ANA; GUIDO MARIO E.

Los Cocos, Córdoba, Argentina

Congreso; XXII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Neuroquímica; 2007

Sociedad Argentina de Neuroquímica

La función no visual en  la retina, involucrada en la medición diferencial de luz ambiental, para sincronizar las funciones circadianas (reguladas por el Núcleo Supraquiasmático), es llevada a cabo por una subpoblación intrinsecamente fotosensible  de las Células Ganglionares de la Retina  (CGRif). Se ha demostrado en varias especies que estas células expresan el fotopigmento Melanopsina. Las CGRif tienen características comunes con los fotorreceptores rabdoméricos, presentes en invertebrados, postulados como las primeras células fotorreceptoras aparecidas en el curso de la evolución. Los fotorreceptores rabdoméricos tienen diferencias consistentes con los ciliares (conos y bastones), a nivel de especialización de membrana, secuencia aminoacídica, cascadas de fototransducción, etc (Arendt D, 2003) Resultados previos de nuestro laboratorio indican que las CGRs de pollo, en el estadío embrionario 8 (E8) son fotosensibles, son osciladores circadianos per se (sintetizan melatonina, con un pico diurno) (Garbarino-Pico et al., 2004), y la cascada de fototransducción  involucrada es similar a la presente en invertebrados. (Contín et al., 2006).   Nuestros objetivos fueron investigar la expresión de diversos ARNm involucrados en especificación (factores de transcripción), mecanismos de fototransducción de invertebrados y vertebrados, y enzimas involucradas en el ciclo de regeneración de cromóforo, desde estadío embrionario 4 hasta estadío post-natal 10. Los ARNm  analizados fueron: a) Factores de transcripción Pax6, Brn3 y CRX, b) fotopigmentos clásicos (rodopsina y opsina roja) y fotopigmentos no visuales (melanopsina similar a Xenopus, y variante similar a mamífero), c) las transducinas tipo proteína G participantes en ambas cascadas (a-trans y Gq), d) enzimas del ciclo visual  (RGR, Peropsina, BCO, RPE 65. Se estudiaron los mismos transcriptos en  cultivos de CGR inmunopurificados de 8 días , por RT-PCR y RT-PCR en tiempo real. Resultados preliminares indican una aparición temprana de transcriptos involucrados en el desarrollo, especificación y  función de las CGRs (día embrionario 4-5). Aquellos transcriptos relacionados al desarrollo de fotorreceptores clásicos o a la visión aparecen más tarde en el desarrollo. Los cultivos de CGR estadío E8 muestran un patrón diferencial en los transcriptos respecto a retina total. Los resultados sugieren la idea de que en estadíos embrionarios tempranos de la retina de pollo, osciladores, fotopigmentos y elementos de la cascada de fototransducción de invertebrados podrían converger en la misma población de CGR. Esta evidencia indica un interesante paradigma evolutivo, ya que estas células conservan caracteres de células ancestrales de invertebrados, y se plantea la pregunta:  Cuál es el objetivo de que estas células sean fotosensibles y funcionales desde estadíos tan tempranos?