Interacción de B2-glicoproteína I con membranas de fosfolípidos negativos

MARIANA PAOLOROSSI; GUILLERMO G. MONTICH

Rosario, Argentina

Jornada; Jornada de Lípidos; 2008

Interacción de B2-glicoproteína I con membranas de fosfolípidos negativos   B2-Glicoproteína I (B2GPI) es una glicoproteína soluble de plasma humano. Su función no ha sido totalmente esclarecida pero se sabe que, a través de la interacción con fosfolípidos aniónicos de la membrana celular, forma complejos autoantigénicos y participa en numerosos eventos fisiológicos y patogénicos (Síndrome antifosfolípido y Lupus eritematoso, entre otros). El objetivo de este trabajo es estudiar la interacción de B2GPI con membranas lipídicas,  determinar el balance entre las fuerzas hidrofóbicas y electrostáticas que establecen dicha interacción y estudiar los cambios conformacionales y de estabilidad producidos en la proteína y en los lípidos a causa de la unión. B2GPI fue purificada a partir de plasma humano. Se utilizaron vesículas unilamelares grandes  de POPG, DPPG, DMPG y POPC. B2GPI interacciona con vesículas aniónicas e induce la agregación de los complejos lípido-proteína en cuerpos macroscópicos que no presentan fusión de las membranas lipídicas. Mediante calorimetría diferencial de barrido y espectroscopía de absorción en el infrarrojo se observó que B2GPI en solución presenta temperatura media de transición (Tm) = 64 ºC. La proteína unida presentó una disminución en la Tm de entre 3 y 8 grados mientras que la Tm de los lípidos de fase gel a fase líquido ordenada, en el caso de vesículas de DMPG y DPPG, no se vio afectada por la interacción. Se determinó una leve variación de la estructura secundaria de la proteína unida con respecto a la de la proteína en solución y, a nivel de los fosfolípidos, se observó una disminución de la movilidad de los metilenos de las cadenas hidrofóbicas interactuantes con respecto a las del lípido puro. A temperaturas mayores a la de la transición de la proteína, los complejos macroscópicos y el efecto ordenador sobre los metilenos de los lípidos desaparecieron, lo cual podría deberse a la disociación del complejo lípido-proteína como resultante del desplegamiento térmico de la proteína.