Separación de fases en monocapas y bicapas de mielina

RAFAEL GUSTAVO OLIVEIRA; SCHNECK, E.; SCHUBERT, T.; TANAKA, M.; MAGGIO, B.

Quilmes, Argentina

Taller; Taller de la Soc. Arg. Biofisica: Biofísica de macromoléculas: aspectos estructurales e implicancias biológicas y biotecnológicas; 2007

El presente trabajo tiene por objetivo la determinación de un diagrama de fases para sistemas de mielina, en función de variables externas, esto es manteniendo la composición lipo-proteica natural de la membrana. Esto permitiría determinar si las técnicas actualmente en uso para aislar dominios de membrana (tratamiento en frío con detergentes) pueden modificar el estado de la misma. Se comparan los resultados obtenidos para sistemas de monocapas en interfase aire/agua y vesículas en suspensión acuosa. Para las vesículas de mielina se obtuvieron difractogramas de polvo simultáneamente para SAXS (small angle x ray scattering) y WAXS (wide angle x ray scattering) en diferentes condiciones ambientales. Dichas condiciones se refieren a la composición de solutos no iónicos o iónicos, tanto monovalentes como bivalentes. Asimismo, para cada condición se realizó un barrido térmico entre 10 y 45 ºC, que comprende aproximadamente desde el rango fisiológico hasta al empleado en la obtención de dominios de membranas por extracción con detergentes. Los difractogramas de SAXS permiten determinar (a través de la separación de los picos de difracción correspondiente al espaciamiento interlamelar) si existe o no coexistencia de fases en respuesta a la composición del entorno.  El enfriamiento y/o iones divalentes inducen separación de fases. En tanto que en monocapas en interfase aire/agua, la observación microscópica muestra que bajas presiones laterales o iones inducen separación de fases. Los resultados claramente muestran que la mielina es sensible a las condiciones ambientales en el rango estudiado, mostrando una o mas fases dependiendo del entorno. Además, los procedimientos empleadas para la separación de dominios de membrana (tales como el enfriamiento) no solo estaría separando dominios de membrana, sino que muy probablemente los estaría creando en una membrana que de otra manera seria homogénea.