Mecanismo de activación de la síntesis de fosfolípidos por la proteína c-Fos en el retículo endoplásmico

ANDRES M CARDOZO GIZZI; ADOLFO R. ALFONSO PECCHIO; MARIANNE L. RENNER; BEATRIZ LEONOR CAPUTTO

Santa Fe

Congreso; VI Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular de Lípidos Y Lipoproteínas; 2014

Universidad Nacional del Litoral

Evidencias previas del laboratorio han demostrado que la proteína c-Fos, de manera independiente de su actividad como factor de transcripción tipo AP-1, activa la síntesis de fosfolípidos. Utilizando homogeneizados de células NIH3T3 quiescentes, encontramos que c-Fos recombinante activa in vitro fosfatidato fosfohidrolasa (FF), CDP-diacilglicerol sintasa y fosfatidilinositol 4-quinasa IIα pero no a fosfatidilinositol sintasa ó fosfatidilinositol 4-quinasa IIβ. Mediante ensayos de co-inmunoprecipitación y de microscopía FRET establecimos una interacción física entre c-Fos y las enzimas que activa mientras que c-Fos no se asocia a enzimas cuya actividad no regula. Para caracterizar más precisamente el fenómeno, empleamos además un sistema de micelas mixtas de Triton X-100/fosfatidato en donde medimos la actividad de Lipin1b (una de las principales FF en mamíferos) purificada hasta homogeneidad en presencia/ausencia de c-Fos. En este sistema altamente simplificado, encontramos que c-Fos activa la actividad enzimática de Lipin1b. Los resultados apoyan nuestra hipótesis de que c-Fos se asocia físicamente con las enzimas responsables de la síntesis de fosfolípidos que es capaz de activar. Refuerza a su vez el concepto de una proteína capaz de incrementar per se actividades enzimáticas claves en eventos celulares que requieren altos niveles de síntesis de lípidos como proliferación o diferenciación.