CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

Oligosacáridos de las cadenas de O-glicanos del tipo mucinas están frecuentemente sobre-expresados y aberrantemente glicosilados en células de tumores epiteliales. El core 1 (Galβ1-3GalNAcα-O-) de O-glicanos tipo mucinas, también llamado disacárido de Thomsen-Friedenreich (TFD), es un ejemplo de estructuras crípticas que se sobreexponen en células tumorales debido a modificaciones en el perfil de sus glicosiltransferasas. Esta molécula es un atractivo modelo para el estudio de la inmunogenicidad de moléculas glucídicas pequeñas, como también un potencial candidato para inmunoterapia específica en pacientes con cancer. El objetivo del presente trabajo es estudiar variantes estratégicas en la síntesis del inmunógeno, con la intención de dirigir la respuesta inmune al TFD. Aquí se ensayó la utilización de un linker en la conjugación del BzlaTFD a una proteína carrier (KLH). Mediante la unión covalente del linker Lys5, se lo conjugó a KLH succinilada. El BzlaTFD fue oxidado utilizando galactosa oxidasa y posteriormente conjugada a Lys5-KLH por aminación reductiva. El glicoconjugado sintetizado fue utilizado como inmunógeno en ratones Balb/c, a los que se les estudió la respuesta humoral. Ensayos de ELISA demostraron que los anticuerpos así obtenidos (IgG e IgM) fueron capaces de reconocer a BzlaTFD como también el antígeno tumoral T-MUC1. Mediante ELISA competitivo pudo apreciarse que esa interacción era mediada por la región glucídica. Ensayos de inmunofluorescencia y cell ELISA muestran que estos anticuerpos son capaces de reconocer líneas celulares de tumores epiteliales humanos como HT29, MCF7 y T47D. Esta interacción también es mediada por estructuras relacionadas al TFD. El presente trabajo demuestra potenciales beneficios del uso de Lys5 como linker del BzlaTFD, en el intento de dirigir una respuesta inmune humoral hacia moléculas relacionadas al TFD expresadas en células de tumores epiteliales.