Regulación post-transcripcional en la expresión diferencial de antígenos de superficie en Giardia lamblia

PRUCCA CG; QUIROGA R; SLAVIN I; LUJÁN HD

Curitiba, Brazil.

Workshop; Workshop: Avaliacao pos-genomica da expressao genica em parasitas.; 2007

Giardia lamblia es un protozoario parásito causal de enfermedad intestinal en cualquier lugar del mundo y uno de los organismo eucariotas mas primitivos. Giardia, similar a otros parásitos unicelulares, presenta variación antigénica. Este protozoario se encuentra recubierto en su totalidad por una proteína perteneciente a una gran familia denominadas proteínas variables de superficie (VSPs). Estas moléculas presentan un rango de tamaño que va desde 20 a 200 kDalton. Estructuralmente se componen por una región amino terminal muy variable y rica en cisteína (con numerosos motivos CxxC), como así también una región carboxilo temrinal compuesta por un dominio transmembrana y una extensión citosólica compuesta sólo por cinco aminoácidos (CRGKA). Hemos evidenciado la presencia y la actividad de dos enzimas claves en el proceso de silenciamiento post-transcripcional: una ARN polimerasa dependiente de ARN (gRdRP) y una nucleasa de ARN doble cadena (gDicer). Estas enzimas muestran homología con los componentes de la maquinaria de silenciamiento post transcripcional ya descriptos en otros eucariotas, sugiriendo una función similar en esta primitiva célula. Ensayos de Northern Blot revelaron que las mismas presentan expresión estable durante todo el ciclo de vida del parásito. La disminución en la expresión (knock-down) de estas dos enzimas da lugar a la presencia de trofozoítos que expresan más de una proteína variable de superficie, hecho que fue confirmado mediante ensayos de citometría de flujo e inmunofluorescencia utilizando anticuerpos monoclonales; además de ensayos de qRT-PCR utilizando primers específicos para diferentes VSPs. Estos resultados involucran a estos dos componentes en la regulación de la variación antigénica en Giardia.