INIMEC - CONICET   05467
INSTITUTO DE INVESTIGACION MEDICA MERCEDES Y MARTIN FERREYRA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Presencia de una isoforma truncada del REα en membrana de neuronas hipotalámicas
Autor/es:
S.V. GOROSITO Y M.J. CAMBIASSO
Lugar:
LOS COCOS, CORDOBA
Reunión:
Congreso; XXII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación en Neurociencias; 2007
Resumen:
Trabajos previos de nuestro laboratorio demostraron que el efecto axogénico de estradiol (E2) no depende del mecanismo genómico clásico sino de un mecanismo de membrana en el que participan Ca2+, PKC y ERK. Existen evidencias que señalan la participación de receptores de membrana para estrógeno, tanto clásicos (REα/β) como no clásicos (GPR30), en la activación de cascadas de señalización intracelular. Sobre la base de estos antecedentes nos propusimos identificar el RE involucrado en nuestro modelo. Luego de 48 h. in vitro las neuronas hipotalámicas fueron estimuladas por 15 min. con un agonista específico para REα (PPT; 1, 10, 100 nM) o para REβ (DPN; 1, 10, 100 nM) y luego se analizó la activación de ERKs por Western Blot. PPT produjo aumento de la fosforilación de ERKs a todas las concentraciones estudiadas, sin embargo DPN solo lo hizo a 100nM. A continuación nos propusimos buscar el RE en fracción de membrana obtenida por ultracentrifugación en gradiente de Percoll a partir de homogenatos de hipotálamos de fetos machos de E16. El análisis por Western Blot de la fracción de membrana plasmática mostró una banda de »50 kDa inmunorreactiva para el anticuerpo contra REα (MC-20). No se observaron bandas inmunorreactivas para REβ ni para GPR30. El mismo resultado se obtuvo a partir de neuronas en cultivo en las que se marcaron con sulfo-biotina las proteínas de la superficie celular. Estos resultados sugieren que la activación rápida de ERK inducida por E2 estaría mediada por un REα truncado presente en la membrana plasmática de neuronas hipotalámicas y constituyen otra evidencia que apoyan nuestra hipótesis de un mecanismo no-clásico para la acción de E2 en neuronas hipotalámicas in vitro.