Importancia Biologica de la Arginina Deiminasa en el Proceso de Crecimiento y Diferenciación del Protozoario Intestinal Giardia lamblia”

VRANYCH CV; RIVERO MR; TOUZ MC; ROPOLO AS

Chascomus. Buenos Aires.

Simposio; XXII Reunion Cientifica Anual. Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias 2007.; 2007

Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias

Importancia biológica de la enzima arginina deiminasa en el proceso de crecimiento y diferenciación del protozoario intestinal Giardia lamblia.  Vranych C, Rivero MR, Touz MC, Rópolo A. Instituto de Investigaciones Médicas M y M Ferreyra. INIMEC (CONICET). Córdoba. aropolo@immf.uncor.edu La superficie del trofozoíto de Giardia lamblia esta recubierta por proteínas variables o VSPs. Dichas proteínas se encuentran involucradas en el proceso de variación antigénica en el cual la VSP que se expresa en la superficie es reemplazada por otra antigénicamente diferente. La mayoría de las VSPs son proteínas de membrana Tipo I y poseen una cola citoplasmática invariable de 5 aminoácidos: CRGKA. Mediante ensayos de co-precipitación de proteínas y espectrometría de masas, encontramos que la enzima arginina deiminasa (gADI), que actúa sobre arginina libre convirtiéndola en citrulina (citrulinación), se encontraba asociada a la cola citoplasmática de las VSPs. Eucariotas superiores no poseen ADI pero utilizan peptidil-arginina deiminasas (PADs) para citrulinar residuos arginina unidos a proteínas. Observamos que las VSPs están naturalmente citrulinadas y que gADI es capaz de citrulinar al péptido His6-CRGKA en ensayos in vitro. IFA mostró que la localización de gADI es citoplásmica pero co-localiza con la cola citoplasmática de VSP9B10 cerca de la membrana plasmática. Además, ensayos utilizando mutaciones de VSPs y sobre-expresión de gADI-HA revelaron cambios en el proceso de variación antigénica y citotoxicidad. Durante el enquistamiento, gADI es translocada al núcleo, sugiriendo un rol particular en la formación del quiste. Nuestros resultados muestran que los cambios que se produzcan en el microambiente (anaerobiosis, presencia de anticuerpos, depleción de colesterol) definirán la función de gADI, siendo su acción fundamental en la sobrevida del parásito.