El dominio C-ter de Lfc interacciona con Tctex-1 modulando su efecto neuritogénico

ROBIN MC; SUNG CH; CÁCERES A; CONDE CB

Los Cocos, Córdoba, Argentina

Congreso; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación en Neurociencias; 2006

Sociedad Argentina de Investigación en Neurociencias

Existe un nexo entre el ensamblado de microtúbulos y la regulación de los cambios en la organización y dinámica de filamentos de actina durante el establecimiento de polaridad neuronal. Esta interacción involucra un conjunto de proteínas pertenecientes a la familia de las GTPasas pequeñas del tipo de Rho, Rac, y Cdc42. Recientemente hemos identificado a Tctex-1, una cadena liviana de dineína, como otro importante nexo entre microtubulos y microfilamentos. La actividad axogénica de Tctex-1 es independiente de la función de dineína, pero involucra la activación de Rac y la depolimerización de actina. Por análisis de doble híbrido determinamos que Lfc (Rho-GEF) interacciona con Tctex-1. Nos propusimos identificar las secuencias específicas de Tctex-1 involucradas en la interacción/es con Lfc y analizar la capacidad de regular la actividad Rho-GTPase, y/o promover la axogenesis. Cultivos primarios de neuronas de hipocampo y células CHO-K1 fueron transfectadas con diferentes construcciones de deleción de Tctex-1 y/o de Lfc y analizadas por inmunocitoquímica. Tctex-1 (Δ93-113) mostró efecto neuritogénico no así Tctex-1 (Δ1-14). La sobre-expresión de los dominios C1 (1-231 aa), CTD (577-958aa) de Lfc y Lfc full length mostraron ser ihibitorios para la formación de neuritas. En experimentos de co-transfección el dominio CTD disminuye el efecto neuritogénico de Tctex-1, pero no el de Tctex-1 (Δ93-113).  En células CHO-K1 se observó co-localización de CTD y Tctex-1 y no se observó depolimerización de actina. El dominio C1 no revirtió el efecto neuritogénico en ningún caso.  Estos resultados sugieren que el dominio CTD y estaría interaccionando con el dominio C-ter de Tctex-1, modulando el efecto neuritogénico.