SARA, una proteína involucrada en el tráfico endosomal regula la formación axonal

ARIAS CI; SUNG CH; CÁCERES A; CONDE C

Los Cocos, Córdoba, Argentina

Congreso; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación en Neurociencias; 2006

Sociedad Argentina de Investigación en Neurociencias

La proteína SARA (Smad Anchor for Receptor Activation) posee un dominio de unión a proteínas Smad2 y Smad3 (SBD, Smad-binding domain) y un doble dominio zinc-finger FYVE (Fab1p, YOTB, Vac1p y EEA1), que le permite unirse a PI3P con alta especificidad. El dominio FYVE en SARA dirige su localización a endosomas tempranos, donde puede interaccionar con receptores TGF-ß y Smads. Se ha sugerido que SARA cumpliría una función crucial en el reclutamiento de proteínas Smads al receptor TGF-ß y en asegurar la correcta localización subcelular de este complejo activado (fosforilado). Nos propusimos obtener evidencias acerca de la función de SARA en el establecimiento inicial de polaridad neuronal y en el tráfico de endosomas tempranos. La expresión y distribución de SARA endógena fue analizada en cultivos de neuronas de hipocampo mediante microscopía confocal de alta resolución. Los resultados obtenidos muestran que SARA se distribuye tanto en axones como procesos menores (futuras dendritas) con un patrón punteado característico de endosomas. En la siguiente serie de experimentos evaluamos las consecuencias de la expresión ectopica de SARA y de su inhibición por RNA de interferencia (siRNA) para determinar la posible participación de esta proteina en el desarrollo de polaridad neuronal (e.g. especificacion y elongación axonal). La sobre-expresión de SARA produjo un significativo incremento en el tamaño de los endosomas, formación de varicosidades e inhibición de la elongación axonal. Por el contrario, la supresión de SARA con RNAi, genero neuronas con múltiples neuritas-similares a axones. Proponemos que la sobre–expresión de SARA favorecería la fusión homotípica entre endosomas produciendo vesículas de gran tamaño. Siendo los endosomas estructuras altamente dinámicas, se requiere una constante fusión y fisión de estos para mantener la homeostasis de los compartimentos endosomales. Por lo tanto una mayor fusión entre vesículas podría afectar el delivery de membrana hacia la superficie celular lo cual podría estar produciendo neuritas de menor longitud.