Estudio cinético de la transesterificación de prunina con laurato de vinilo en medio no acuoso catalizada por lipasa B de Candida antarctica

MARÍA RITA MARTEARENA; ELSA SCARONI; GUSTAVO CÉLIZ; MIRTA DAZ

Mendoza, Argentina

Simposio; XVII Simposio Nacional de Química Orgánica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación en Química Orgánica.

       Una actividad económica de gran importancia en la provincia de Salta es la producción de pomelos. Tanto en las cáscaras de pomelos como en frutos pequeños abortados naturalmente por las plantas existe en apreciable cantidad el glicósido de flavanona naringina (4′,5,7– trihidroxiflavanona – 7 - β - D - α - L- ramnosil - (1→2) - β-D-glucósido). Si bien este glicósido tiene aplicaciones como tal debido a numerosos efectos beneficiosos sobre la salud humana, su mercado no es muy grande y es deseable diversificar sus aplicaciones lo que puede llevarse a cabo a través detransformaciones enzimáticas. Se ha propuesto un método muy eficiente de hidrólisis de soluciones sobresaturadas de naringina catalizada por -ramnosidasa con el fin de producir ramnosa, un compuesto muy valioso utilizado en la industria alimenticia. Laeventual producción de ramnosa a partir de naringina dejaría como subproducto glucósido de naringenina, también conocido como prunina (4′,5,7- trihidroxiflavanona-7-β-D-glucósido). Para aprovechar este subproducto y poder incorporarlo en matrices hidrofóbicas una alternativa viable es la acilación con cadenas alquílicas linealescatalizada por lipasas. Se han estudiado los parámetros que afectan las síntesis de derivados acilados con diferentes longitudes de cadena y se han desarrollado métodos de purificación de los mismos. Se los ha caracterizado estructuralmente, y sehan hecho ensayos sobre algunas propiedades de los mismos, tales como actividades antioxidantes, antifúngicas, y antibacterianas. En este trabajo se realiza un estudio de la cinética de la reacción de síntesis de laurato de prunina en acetona a partir de prunina y laurato de vinilo catalizada por lipasa B de Candida antarctica (Novozym 435).       Las reacciones fueron realizadas en tubos herméticamente cerrados utilizando concentraciones variables de sustratos, 300 mg de tamices moleculares y 50 mg de enzima llevando a un volumen final de 3 mL con acetona. La concentración de producto fue determinada por HPLC, utilizando una columna GraceSmart RP-18 de 25 cm de longitud y una elución isocrática con acetonitrilo:agua 80:20, a un flujo de 0,8 ml/min y detección UV a 280 nm.       Se estudió el efecto de la velocidad de agitación sobre las velocidades iniciales en el rango de 60-250 rpm, encontrándose que un valor conveniente fue 170 rpm. El efecto de las concentraciones de ambos sustratos sobre la velocidad de reacción fue estudiado determinado velocidades iniciales. Para ello se realizaron dos series de experimentos variando la concentración de uno de los sustratos y manteniendo constante la del otro. La concentración de prunina fue variada desde 20 hasta 400 mM y la de laurato de vinilo desde 10 hasta 4000 mM. Los datos fueron ajustados por regresión no lineal, utilizando el programa GraphPad Prism versión 4.00 para Windows. El mejor ajuste de los datos experimentales se obtiene con la ecuación derivada para un mecanismo secuencial ordenado Bi-Bi con inhibición por prunina.