INIQUI   05448
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES PARA LA INDUSTRIA QUIMICA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Análisis de la envoltura celular de Lactobacillus johnsonii CRL1647 por AFM (microscopía de fuerza atómica)
Autor/es:
NOVICOV FANCIOTTI MARIANA; VEIGA LIONEL; YBARRA GABRIEL; AUDISIO MARCELA CARINA
Lugar:
San Rafael, Mendoza
Reunión:
Congreso; CLICAP 2015; 2015
Institución organizadora:
Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias aplicadas a la Industria
Resumen:
Lactobacillus johnsonii CRL1647, bacteria con efecto beneficioso sobre colonias de abejas melíferas, se adhiere a las paredes del tubo de vidrio en que se cultiva y hemaglutina. Como las propiedades de superficie pueden estar involucradas en el efecto positivo observado, se decidió estudiar su envoltura celular por microscopía de fuerza atómica (AFM). Para ello, las células de un cultivo activo fueron cosechadas por centrifugación y separadas en alícuotas para recibir los siguientes tratamientos por 1 h a 37°C: LiCl 5M, periodato de sodio 100 mM y proteinasa K 1 mg/mL; los dos últimos modifican la propiedad hemaglutinante de esta cepa. Posteriormente, fueron recuperadas por una centrifugación y analizadas con un microscopio de fuerza atómica. Todas las mediciones se realizaron con una resolución de 512×512 pixeles, a velocidad de barrido de 1 línea/segundo, analizando cuadrados de 500 nm de lado. Se utilizó una punta de silicio Ultra Sharp con radio de curvatura menor a 2 nm. Los cambios superficiales se estudiaron utilizando dos modos de adquisición de imágenes: topografía y fase. Las imágenes topográficas muestran que las células de L. johnsonii control presentaron una superficie relativamente lisa. Las imágenes en modo fase revelan una fractura (evidenciada por un cambio abrupto en el valor de la fase) que recorre longitudinalmente la superficie bacteriana. Dicha fractura se mantiene en las células tratadas con LiCl pero desaparece luego del tratamiento con periodato de sodio. Para este último se observa además, estructuras circulares ausentes en las células sin tratar. El efecto de la proteinasa K produjo tal deformación superficial que impidió obtener información relevante.Estas observaciones concuerdan con las pruebas de hemaglutinación, donde los tratamientos con periodato de sodio o con proteinasa K alteran la capacidad aglutinante de esta cepa mientras que el LiCl no produce efecto alguno. Por otro lado, las rugosidades aumentan en cada tratamiento respecto del control. Para el control se obtuvieron valores de rugosidad con media de alrededor de 3 nm, en tanto que las muestras tratadas alcanzaron valores entre 2 y 4 veces mayores.Los estudios con AFM revelan que la envoltura bacteriana sí se vio afectada con dos de los tratamientos realizados. Estos generaron deformaciones en la envoltura celular que se traducen en la formación de estructuras superficiales pronunciadas que no se observan en las células control y que pueden afectar las propiedades superficiales de esta bacteria.