TOLERANCIA AL CLORURO DE LITIO EN MICROORGANISMOS AISLADOS DEL SALAR DEL HOMBRE MUERTO

FABIANA MARTÍNEZ; VERÓNICA IRAZUSTA; NORMA BEATRIZ MORAGA; VERÓNICA RAJAL

Santa Fe

Simposio; 3er Simposio Argentino de Procesos Biotecnológicos; 2014

El litio (Li) es el metal más liviano sobre la Tierra y dada su elevada reactividad, se encuentra en la naturaleza siempre interactuando con otros elementos. Este metal alcalino ha tomado gran importancia en la actualidad por su versatilidad, que permite que su uso sea muy amplio. Es utilizado por ejemplo para la fabricación de grasas, lubricantes, baterías, cerámicos, aires acondicionados, entre otros (Kaneko et al., 1990). Su importancia en la fabricación de baterías es la de mayor repercusión, ya que, frente a la preocupación del agotamiento de las reservas fósiles, los automóviles que no dependen de dichos combustibles tienen como principal fuente energética a las baterías de litio. La mayor reserva de litio del mundo (alrededor del 85%) se encuentra en lo que se conoce como ?El Triángulo del litio?, superficie comprendida entre los puntos del Salar del Hombre Muerto (Argentina), el Salar de Uyuni (Bolivia) y el Salar de Atacama (Chile) (Dirección de Estudios y Políticas Públicas de COCHILCO, 2009). La minería es una de las actividades más perjudiciales para el medio ambiente, y por esta razón se están estudiando procesos alternativos de obtención de minerales mediados por microorganismos. Por otro lado, la contaminación de suelos ya sea por el mismo proceso de minería o por la eliminación de desechos industriales o domésticos con altas concentraciones de minerales, puede ser mitigada mediante microorganismos, en un proceso llamado biorremediación (Lovley, 2003). Dichos procesos, tanto de obtención de minerales como de mitigación de contaminación, utilizan microorganismos adaptados a ambientes hostiles y que puedan interactuar con el metal de interés. El objetivo de este trabajo fue aislar microorganismos capaces de crecer en medios con elevadas concentraciones de sales a partir de suelos procedentes del Salar del Hombre Muerto y estudiar su tolerancia frente a soluciones de distintas concentraciones de cloruro de litio. Metodología Aislamiento de microorganismos del suelo: Se realizaron extracciones microbianas utilizando dos soluciones diferentes: agua destilada estéril y hexametafosfato al 1%. El protocolo utilizado fue: en Erlenmeyer de 250 mL se colocaron 45 mL de agua destilada estéril (o de hexametafosfato) y 5,0 g de suelo. Se agitó vigorosamente durante 10 min y se dejó decantar 1 h. Transcurrido ese tiempo, se sembraron alícuotas de 100 μL del sobrenadante sin diluir y de la dilución 1/10 en placas de Petri con medio de cultivo rico (Plate Count Agar). Se incubó a 25°C hasta observar crecimiento. Todas las colonias obtenidas fueron repicadas en placas de Petri con medio de cultivo rico preparado con salmuera obtenida del Salar. Este repique se realizó para que crecieran sólo aquellos microorganismos capaces de tolerar elevadas concentraciones de sales. Tolerancia de los microorganismos al cloruro de litio: Se realizó un ensayo cualitativo que consistió en cortar un canal rectangular en el medio sólido en la placa de Petri, sembrar los microorganismos perpendicularmente a él y colocar soluciones de cloruro de litio de concentraciones 7 M y 15 M en respectivos canales. Luego se incubó a 30°C en estufa y se evaluó el crecimiento a los 3 días, determinándolo como la distancia en centímetros desde el canal. Esta medida se utilizó como parámetro indicativo de la tolerancia a la sal (Polti et al., 2007). Resultados A partir de la extracción de microorganismos de suelo del Salar del Hombre Muerto, fueron aisladas 164 cepas bacterianas, de las cuales 115 crecieron en medio de cultivo rico con salmuera. El método de extracción con agua permitió el aislamiento de 69 cepas y el de hexametafosfato, de 95 cepas bacterianas. Teniendo en cuenta el crecimiento microbiano en el ensayo cualitativo de tolerancia al cloruro de litio, se seleccionaron 18 aislamientos. Dichas cepas crecieron en toda la superficie sembrada, incluso al borde del canal, donde el contacto con las soluciones es mayor. Conclusiones  A partir de suelo del Salar del Hombre Muerto y por extracción con agua destilada estéril y hexametafosfato se aislaron 164 microorganismos.  115 de los aislamientos fueron capaces de crecer en presencia de salmuera.  18 aislamientos fueron seleccionados como los más tolerantes al litio por su crecimiento en el ensayo cualitativo del canal sobre el agar.  Los microorganismos tolerantes a las sales utilizan diferentes mecanismos que les permiten crecer en medios ambientes hostiles, por lo que es necesario continuar estudiando su comportamiento con el objetivo de conocerlos en profundidad. Bibliografía Kaneko, S. and Takahashi, W. 1990. Colloids Surf.,47, 69?79. Lovley, D.R. 2003. Nat Rev Microbiol. 1:35-44. Miranda,C. L. Dirección de Estudios y Políticas Públicas de COCHILCO. http://ciperchile.cl/pdfs/litio/estudio_cochilco.PDF Polti M.A., Amoroso M.J. y Abate C.M. 2007. Chemosphere 67: 660-667.