INMOVILIZACION DE ALFA-AMILASA A. ORYZAE EN PERLITA EXPANDIDA MODIFICADA

RODR¨ªGUEZ ZOTELO; SORIA, FERNANDO; DESTEFANIS, HUGO

Ciudad de C¨®rdoba- Argentina

Congreso; XVII Congreso Argentino de Fisicoqu¨ªmica y Qu¨ªmica Inorg¨¢nica, Asociaci¨®n Argentina de Investigaci¨®n Fisicoqu¨ªmica; 2012

Asociaci¨®n Argentina de Investigaci¨®n Fisicoqu¨ªmica.

La inmovilizaci¨®n de prote¨ªnas en materiales s¨®lidos org¨¢nicos y/o inorg¨¢nicos permite su reutilizaci¨®n y facilita la separaci¨®n del biocatalizador de la mezcla de reacci¨®n, evitando la contaminaci¨®n del producto. La perlita es un vidrio volc¨¢nico de alto contenido en s¨ªlice y ¨¢lcalis, con muy bajos tenores de Fe, Ca y Mg, que puede expandirse cuando se expone a altas temperaturas. La ventaja del uso de la perlita expandida en inmovilizaci¨®n de prote¨ªnas reside en que este material es altamente disponible, de bajo costo, de gran estabilidad t¨¦rmica y mec¨¢nica, ausencia de toxicidad y alta resistencia al ataque microbiano. La ¦Á-amilasa fue elegida por su importancia industrial en la licuefacci¨®n del almid¨®n para producir dextrinas requeridas en la manufactura de jarabe de almid¨®n, tambi¨¦n es utilizada conjuntamente con laglucoamilasa en la obtenci¨®n de glucosa. Objetivos: Modificaci¨®n de perlita expandida por tratamiento con TiO2, colorante HE3B, PET-Hidrazida, magnetita y caracterizaci¨®n por an¨¢lisis de superficie espec¨ªfica (BET), distribuci¨®n de poros, FTIR y SEM (scaning electron microscopy). Resultados: Los materiales obtenidos se usaron como soportes para inmovilizar ¦Á- amilasa A.Oryzae por adsorci¨®n, tambi¨¦n fueron tratados con APTES (Aminopropiltrietoxisilano) a fin de analizar la inmovilizaci¨®n por uni¨®n covalente. Los resultados de FTIR de los diferentes materiales no presentan diferencias significativas. Sin embargo las micrograf¨ªas muestran claramente el efecto de los distintos tratamientos sobre la perlita expandida. Las modificaciones del soporte favorecen interacciones m¨¢s efectivas con la enzima. Los valores de actividad (nkat / mg soporte) dela enzima se resumen en la siguiente tabla.Conclusi¨®n: La inmovilizaci¨®n de la enzima es mas efectiva por uni¨®n covalente que poradsorcion ya que en todos los casos la ¦Á-amilasa retuvo m¨¢s su actividad inicial, despu¨¦sde varios ciclos continuos de uso en la hidr¨®lisis de almid¨®n. La enzima unida a Perlita Expandida-TiO2 por uni¨®n covalente presenta la menor actividad inicial pero el mayorporcentaje de retenci¨®n de actividad despu¨¦s del tercer reuso.¦Á-amilasa fue elegida por su importancia industrial en la licuefacci¨®n del almid¨®n para producir dextrinas requeridas en la manufactura de jarabe de almid¨®n, tambi¨¦n es utilizada conjuntamente con laglucoamilasa en la obtenci¨®n de glucosa. Objetivos: Modificaci¨®n de perlita expandida por tratamiento con TiO2, colorante HE3B, PET-Hidrazida, magnetita y caracterizaci¨®n por an¨¢lisis de superficie espec¨ªfica (BET), distribuci¨®n de poros, FTIR y SEM (scaning electron microscopy). Resultados: Los materiales obtenidos se usaron como soportes para inmovilizar ¦Á- amilasa A.Oryzae por adsorci¨®n, tambi¨¦n fueron tratados con APTES (Aminopropiltrietoxisilano) a fin de analizar la inmovilizaci¨®n por uni¨®n covalente. Los resultados de FTIR de los diferentes materiales no presentan diferencias significativas. Sin embargo las micrograf¨ªas muestran claramente el efecto de los distintos tratamientos sobre la perlita expandida. Las modificaciones del soporte favorecen interacciones m¨¢s efectivas con la enzima. Los valores de actividad (nkat / mg soporte) dela enzima se resumen en la siguiente tabla.Conclusi¨®n: La inmovilizaci¨®n de la enzima es mas efectiva por uni¨®n covalente que poradsorcion ya que en todos los casos la ¦Á-amilasa retuvo m¨¢s su actividad inicial, despu¨¦sde varios ciclos continuos de uso en la hidr¨®lisis de almid¨®n. La enzima unida a Perlita Expandida-TiO2 por uni¨®n covalente presenta la menor actividad inicial pero el mayorporcentaje de retenci¨®n de actividad despu¨¦s del tercer reuso.