Beneficial effects of L. rhamnosus RC007 in models of intestinal inflammation

G. GARCIA; L. CAVAGLIERI; C.A. DOGI; C. GRECO; A. DE MORENO DE LEBLANC

Buenos aires

Simposio; I Simposio Internacional - X Jornadas y Reunión Anual de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria; 2017

AAIV Capítulo de la Sociedad de Medicina Veterinaria

En los sistemas productivos porcinos, el destete es un período clave caracterizado por inflamación intestinal y desbalances microbianos, con la consecuente aparición de diarreas. Además, en el postdestete los animales comienzan a alimentarse con dieta sólida, en la cual están presentes las micotoxinas. En los últimos años, la utilización de probióticos como aditivos alimentarios es ampliamente utilizada para estimular la salud intestinal de los cerdos en el postdestete. El objetivo del trabajo fue evaluar el efecto de L. rhamnosus RC007 frente a dos agentes productores de inflamación intestinal, uno biológico con la micotoxina deoxinivalenol (DON) y uno químico con 2,4,6-acidotrinitrobenzensulfonico (TNBS), en un modelo ex vivo de explantos intestinales y un modelo in vivo en ratón, respectivamente. En el modelo de inflamación producido por DON, se utilizaron explantos de yeyuno de cerdos de 5 semanas de edad. Los tratamientos evaluados fueron: 1) explantos con medio William?s E. (control) durante 3h, 2) explantos expuestos durante 3h a DON (10 μM), 3) explantos con L. rhamnosus RC007 (109 UFC/ml) durante 3h, 4) explantos pre-incubados 1h con L. rhamnosus RC007 (109 UFC/ml) y luego expuestos durante 3h a DON (10 μM). Se extrajo el RNA y se realizó qPCR para la determinación de IL-1β, IL-8 and IL-22. Se midió la permeabilidad celular en cámara Ussing. En el modelo de inflamación producido por TNBS, se utilizaron ratones machos BALB/c. Los tratamientos fueron: 1) Grupo Control (Control sin inflamación): 6 ratones alimentados con dieta convencional suplementada con PBS 10 días consecutivos y con inoculación intrarectal de PBS-etanol (vehículo de la droga TNBS) el día 10 del experimento (Sin TNBS), 2) Grupo TNBS (Control con inflamación): 6 ratones alimentados con dieta convencional suplementada con PBS10 días consecutivos y con inoculación intrarectal de TNBS (disuelta en PBS-etanol) el día 10 del experimento 3) Grupo L. rhamnosus RC007-TNBS: 6 ratones alimentados con dieta convencional suplementada con L. rhamnosus RC007 (108 UFC/ml) 10 días consecutivos y con inoculación intrarectal de TNBS (disuelta en PBS-etanol) el día 10 del experimento. El sacrificio de los animales se realizó el día 14 del experimento. Se evaluó el peso de los animales, el índice de daño micro/macroscópico en intestino, la translocación microbiana a hígado y MCP-1, TNFa, IL-12 e IL10 en fluido intestinal por citometría de flujo. Los resultados del modelo ex vivo mostraron que la preincubación con L. rhamnosus RC007 redujo la toxicidad producida por DON a través de la disminución dela expresión de las citoquinas proinflamatorias IL-1β, IL-8, IL-22 y de la disminución de la permeabilidad paracelular. Con respecto al modelo in vivo, los ratones que recibieron L. rhamnosus RC007 comenzaron a recuperar antes el peso corporal, lo cual se relaciona con menor daño micro/macroscópico en intestino y consecuentemente disminución de la translocación microbiana producida por la inflamación. Además, el perfil de citoquinas estudiado indicó que un aumento de la relación IL-10/TNFa mostrando un potencial efecto antiinflamatorio de la administración de la bacteria láctica. En conclusión, L.rhamnosus RC007 tiene la capacidad de modular la respuesta inmune frente a un estado de inflamación, mejorando así la homeostasis intestinal y en consecuencia podría aumentar los índices productivos. Estos y resultados previos demuestran que esta cepa tiene potencial para formular un aditivo alimentario novedoso destinado a mejorar la producción animal.