Efecto de Lactobacillus jensenii TL2937 en la respuesta inmunotranscriptómica de células epiteliales intestinales porcinas inducida por el desafio con Escherichia coli enterotoxigénica

NANA SATO; JULIO VILLENA; LEONARDO ALBARRACÍN; HISASHI ASO; HISAKAZU KOBAYASHI; HARUKI KITAZAWA

Rosario

Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología, XIV Congreso Argentino de Microbiología y IV Congreso, Latinoamericano de Microbiología de Medicamentos y Cosméticos; 2016

Asociación Argentina de Microbiología

Lactobacillus jensenii TL2737 (Lj) es una cepa inmunobiótica capaz de modular beneficiosamente la inmunidad intestinal en cerdos. En este trabajo se evaluó el efecto de Lj en la respuesta transcriptómica de células epiteliales intestinales porcinas (células PIE) inducida por el desafio con Escherichia coli enterotoxigénica (ETEC), con el objetivo de avanzar en la comprensión de los mecanismos que intervienen en la actividad protectora de dicha cepa y de encontrar nuevos biomarcadores para la detección y selección de immunobióticos. Para ello, las células PIE fueron tratadas con Lj durante 48 horas y luego desafiadas con ETEC. Células PIE sin tratamiento inmunobiótico se emplearon como controles. Luego de 12 horas del desafío la respuesta transcriptómica se estudió empleando Porcine (V2) Gene Expression Microarray (Agilent Technologies) y GeneSpring software version 6.1. Los genes cuya expresión se incrementó más de 2 veces (log2> 1) después del tratamiento con ETEC fueron seleccionados para el análisis con DAVID software versión 13.1 de acuerdo con las bases de datos KEGG y GO. Los resultados mostraron que los cambios más notables inducidos por el desafío con ETEC en las células PIE se registraron en la expresión de citoquinas seguido de moléculas de adhesión, y factores de los sistemas del complemento y de la cascada de coagulación. Observamos además, que la estimulación con Lj moduló de manera diferente la expresión génica de las células PIE desafiadas con ETEC. El análisis de la expresión de genes demostró claramente un efecto anti-inflamatorio de la cepa Lj. El tratamiento inmunobiótico redujo significativamente la expresión de quimioquinas (CCL8, CXCL5, CXCL9, CXCL10 y CXCL11), moléculas de adhesión (SEL-E y VCAM-1), factores de complemento (C1R, C1S, C3 y CFB), y proteínas del sistema de coagulación (factor tisular), lo cual se confirmó por RT-PCR. El análisis integral de la expresión génica en las células PIE mediante microarrays y la confirmación mediante RT-PCR nos permitieron identificar con éxito genes que podrían ser utilizados como biomarcadores potenciales para la detección y selección de inmunobióticos anti-inflamatorios, permitiendo el desarrollo de nuevos alimentos funcionales inmunomoduladores destinados a prevenir o tratar trastornos intestinales inflamatorios en cerdos.