CERELA   05438
CENTRO DE REFERENCIA PARA LACTOBACILOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
CEPA PROBIÓTICA ASOCIADA A INMUNIZACIÓN CON LACTOCOCCUS LACTIS-PPPA INACTIVADA REDUCE LA COLONIZACIÓN POR S.PNEUMONIAE EN RATONES INFANTES
Autor/es:
VINTIÑI ELISA; ALLORI CRISTINA; ALVAREZ SUSANA; MEDINA MARCELA
Lugar:
Tafí del Valle, Tucumán
Reunión:
Jornada; XXV Jornadas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2008
Institución organizadora:
Asociación de Biología de Tucumán
Resumen:
Cepa probiótica asociada a inmunización con Lactococcus lactis-PppA inactivada reduce la colonización por S.pneumoniae en ratones infantes Vintiñi E1, Allori C1, Alvarez S1,2 y Medina M 1,2* 1- CERELA (CONICET). Chacabuco 145. (4000).Tucumán. Argentina. 2- Universidad Nacional de Tucumán. *mmedina@cerela.org.ar Las infecciones causadas por S. pneumoniae representan un importante problema de salud, especialmente en la población infantil, en ancianos y en pacientes inmunocomprometidos. En nuestro laboratorio, empleando un sistema de expresión inducible por nisina, se desarrolló una bacteria recombinante que expresa la proteína protectiva A (PppA) de neumococo en su superficie (LPA+). La administración intranasal (IN) de LPA viable, indujo la producción de anticuerpos específicos en ratón, resultando efectiva en la protección del huésped frente al desafío con neumococo. Sin embargo el empleo de una bacteria recombinante viva por vía IN, resultaría una limitación para su empleo en humanos. En base a ello el objetivo del presente trabajo fue evaluar diferentes estrategias de inmunización de mucosa respiratoria con LPA viva, inactivada y en asociación con una cepa probiótica, a fin de seleccionar el tratamiento que reduzca y/o evite la colonización de nasofaringe y pulmón y el pasaje a sangre del patógeno, empleando un modelo de infección diseminada en ratones infantes. Para ello, los animales fueron inmunizados preventivamente por vía IN con: a) LPA+, b) LPA inactivada (LPAM) y c) LPAM + Lactobacillus casei (LPAM+Lc), siguiendo un protocolo de inmunización puesto a punto en nuestro laboratorio. Los animales empleados como controles recibieron PBS (C) y la bacteria láctica recombinante sin inducir (LPA-). Al final de cada tratamiento los ratones fueron desafiados por vía IN con S. pneumoniae en una dosis de 106 UFC/ratón. Se evaluó la protección frente a 2 serotipos de neumococo: 14 (de gran incidencia en nuestro medio) y 3 (frecuentemente asociado a infección sistémica). En el día 0 (previo al desafío) y en los días 1, 5, 10 y 15 posteriores a la infección se tomaron muestras de lavado nasal (LN), pulmón (P) y sangre a fin de realizar el recuento del patógeno. Los resultados obtenidos demostraron que el tratamiento combinado LPAM+Lc fue el más efectivo para reducir  la colonización de nasofaringe y pulmón por ambos serotipos (Ej: LN [Log10 UFC/ml], 14, d5, C=5,19±0,15; LPA+=2,31±0,19; LPAM: 3,41±0,23; LPAM+Lc=1,78±0,24; P [Log10 UFC/g], 14, d5, C=5,63±0,32, LPA+=negativo, LPAM=2,81±0,34, LPAM+Lc=negativo). La inmunización con LPA+ y LPAM+Lc redujo significativamente el recuento del patógeno en sangre a las 24 hs post-infección en comparación con C y LPA-, los hemocultivos resultaron negativos para ambos serotipos a partir del día 5 post-infección (Log10 UFC/ml, d1, 3, C=5,11±0,34, LPA+=2,41±0,22, LPAM=2,98±0,25,  LPAM+Lc=2,02±0,31). Los resultados obtenidos demuestran que si bien la bacteria recombinante inactivada resultaría menos efectiva que la viable en la protección del huésped frente al desafío con S. pneumoniae, la administración asociada de la cepa probiótica ejercería un importante efecto adyuvante, constituyendo de este modo una alentadora alternativa como estrategia de vacunación en humanos.