PÉPTIDOS DERIVADOS DE LA SECUENCIA NH2-TERMINAL DE BACTERIOCINAS SUBCLASE IIA DE BACTERIAS GRAM (+) PRESENTAN ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA

EMILIANO SALVUCCI; FERNANDO SESMA

Córdoba, Argentina

Congreso; Congreso Argentino de Microbiología, AAM; 2007

Asociación Argentina de Microbiología

Las bacteriocinas son péptidos antimicrobianos, de síntesis ribosomal, secretados por diferentes especies bacterianas. Entre las bacteriocinas de bacterias Gram (+), las de la subclase IIa son las más numerosas y mejor estudiadas. Son péptidos pequeños de hasta 6 KDa, resistentes al calor y no modificados postraduccionalmente. Estas comparten una secuencia consenso YGNGVxCxxxxC en el extremo NH2-terminal y presentan una fuerte actividad contra <i> Listeria monocytogenes</i>, un patógeno de origen alimentario. Enterocina CRL35 es una bacteriocina clase IIa producida por <i>Enterococcus mundtii</i> CRL35, cepa aislada de un queso artesanal de Tucumán. El péptido fue purificado y secuenciado y recientemente los genes de producción fueron clonados y caracterizados. Con el fin de elucidar la relación estructura-función de las bacteriocinas, en este trabajo hemos analizado la actividad antimicrobiana de péptidos pequeños sintéticos (<20 mer) derivados de la región NH2-terminal de enterocina CRL35 (NH2-KYYGNGVSCNKKGCS) y de otras bacteriocinas de la subclase II: mesentericina Y105, sakacina P, pediocina PA1, piscicolina 126, listeriocina 743A, divercina V41 y enterocina A. Los primeros resultados mostraron que sorprendentemente estos péptidos cortos tenían actividad antimicrobiana frente a cepas de <i>Listeria</i> y otras bacterias, aunque a concentraciones muchos mayores que las bacteriocinas originales: CIM de 10 uM para los péptidos vs 100 pM  para las bacteriocinas. Además los péptidos mostraron un espectro de actividad inhibitoria similar al de la bacteriocina original. Péptidos derivativos más cortos de enterocina 35 (10 a 14-mer)  no mostraron actividad, así como los péptidos derivados de divercina V41 (17-mer) y enterocina A (20-mer), aún a concentraciones muy altas (1000 uM) Al igual que la bacteriocina original, el péptido derivado de enterocina CRL35 fue capaz de disipar el potencial de membrana de células enteras de <i>Listeria innocua</i>. Análisis cromatográficos y de espectroscopía de masa mostraron que los péptidos en solución acuosa pueden formar puentes disulfuro intermoleculares a través de las dos cisteínas de la molécula, lo cual les permite el ensamblado en la membrana plasmática para la formación de los poros característicos.   El hecho de que las bacteriocinas truncadas tengan el mismo espectro de acción que las bacteriocinas completas sugiere que el espectro de actividad está determinada por el extremo NH2 y no por el COOH, como fue sugerido previamente por otros autores. Este trabajo representa el primer informe sobre actividad antimicrobiana de péptidos cortos derivados de bacteriocinas de la clase IIa.