Obtención de péptidos antimicrobianos híbridos entre la bacteriocina enterocina CRL35 y la microcina colicina V

ACUÑA, LEONARDO; SALVUCCI, EMILIANO; NIKLISON, VICTORIA; SESMA, FERNANDO; BELLOMIO, AUGUSTO

Tucuman, Argentina y Paraguay

Jornada; Primeras Jornadas de Jóvenes Investigadores UNT-AUGM (Universidad Nacional de Tucumán-Asociación de Universidades Grupo Montevideo); 2007

AUGM

Introducción: Enterocina CRL35 es una bacteriocina producida por bacterias Gram (+). Colicina V es una microcina secretada por enterobacterias Gram (-). Tienen un espectro antimicrobiano reducido a bacterias filogenéticamente relacionadas a la cepa productora, Gram (+) o Gram (-), respectivamente. El objetivo de este trabajo es obtener proteínas de fusión recombinantes Ent35-CvaC y CvaC-Ent35 con actividad antimicrobiana de amplio espectro. Materiales y métodos: se amplificaron por PCR los genes de enterocina CRL35 y colicina V. Luego, éstos fueron fusionados usando la técnica del megaprimer. Los amplicones se clonaron en el vector pET28 y se transformó la cepa BL21[DE3] de Escherichia coli. Las transformantes fueron cultivadas en medio LB líquido y la expresión génica fue inducida con IPTG. Para corroborar la correcta expresión de los híbridos se realizó una electroforesis en gel de poliacrilamida y se determinó actividad frente a cepas sensibles y resistentes. Resultados: en las reacciones de PCR asimétricas se obtuvieron los genes quiméricos ent35-cvaC y cvaC-ent35. Se observó la expresión por electroforesis en geles de poliacrilamida y la presencia de actividad de los híbridos frente a bacterias Gram (+) y Gram (-). Conclusiones: Se obtuvieron péptidos híbridos con actividad antimicrobiana de amplio espectro.