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Las bacterias lácticas (BL) predominan en numerosos ecosistemas humanos y animales y se utilizan en el diseño de productos probióticos, en los que se pueden incluir también metabolitos antimicrobianos (bacteriocinas) para incrementar la efectividad de la fórmula. En este trabajo se avanzó en la purificación, caracterización y evaluación del modo de acción de una bacteriocina que produce Lactococcus lactis CRL 1584, autóctona de criadero de Lithobates catesbeianus, que inhibe microorganismos asociados a epizootias en ranarios (síndrome de la pata roja-SPR) y a Listeria monocytogenes. Se determinó que a medida que se incrementó la temperatura de incubación, aumentó la velocidad de crecimiento de la BL, con valores máximos a 36°C. La mayor producción de biomasa se detectó entre 20 y 30°C y la de bacteriocina a 20 y 25°C. Se utilizaron diferentes técnicas para purificar la bacteriocina: la precipitación con sulfato de amonio (40%) permitió recuperar una elevada actividad bacteriocina, que mostró afinidad por una resina de intercambio catiónico a pH ácido y eluyó con NaCl 100 mM. Al purificar la muestra por RP-HPLC se obtuvo una fracción única con actividad antagónica (masa molecular=1.151,69 Da). La secuenciación parcial del péptido purificado permitió proponer una región con una secuencia PHKPLPTP probable. La bacteriocina posee naturaleza peptídica y mantuvo su actividad antagónica a pH 7 al incubarla por 10 min a 60°C. Además, evidenció efecto bactericida sobre Citrobacter freundii (patógeno asociado a SPR) y L. monocytogenes, el que se incrementó en presencia de ácido láctico y ácido láctico+H2O2, respectivamente. La bacteriocina que produce L. lactis CRL 1584 constituye una opción adecuada para su aplicación como biopreservante de ancas de rana y para su inclusión en la formulación de productos probióticos destinados a criaderos de rana toro, y potencialmente de especies de anfibios en los que los brotes de SPR son frecuentes.