Crecimiento de lactobacilos potencialmente probióticos en un medio de cultivo que simula el fluido vaginal

MARÍA SILVINA JUÁREZ TOMÁS, MARÍA ELENA NADER-MACÍAS

Córdoba, Argentina

Congreso; XI Congreso Argentino de Microbiología; 2007

Asociación Argentina de Microbiología

Una fórmula probiótica a ser aplicada en vagina humana debe establecer contacto con el fluido vaginal, el cual posee propiedades físicas y químicas particulares. Para estudiar ciertos aspectos del ecosistema vaginal y la posibilidad de adaptación de los microorganismos incluidos en productos farmacéuticos, se necesitan condiciones “in vitro” comparables a las condiciones “in vivo” en las que se aplicarán. Por lo tanto, es necesario disponer de un medio sintético con una composición similar a las secreciones del tracto genital. Los objetivos de este trabajo fueron: a) formular un medio de cultivo similar al fluido vaginal en base a medios publicados por otros investigadores y a la composición de las secreciones vaginales, y b) evaluar en ensayos “in vitro” el crecimiento y la expresión de las propiedades benéficas de lactobacilos vaginales (LV) potencialmente probióticos en el medio vaginal diseñado. Los LV empleados y sus características potencialmente probióticas fueron: Lactobacillus  acidophilus CRL 1251, CRL 1266 y L. paracasei CRL 1289 (productores de peróxido de hidrógeno), L. gasseri CRL 1259 (productor de cantidades inhibitorias de ácido láctico contra microorganismos uropatógenos), L. salivarius CRL 1328 (productor de bacteriocina) y L. johnsonii CRL 1294 (auto-agregante). El medio similar al fluido vaginal (MSFV) propuesto en este trabajo contiene (g/l): glucógeno, 10; glucosa, 10; ácido láctico, 2; ácido acético, 1; albúmina, 2; mucina, 0,25; urea, 0,50; NaCl, 3,5; KCl, 1,5; cisteína, 0,50; y Tween 80, 1,064; pH 4,25 ± 0,05. El MSFV permitió el crecimiento de la mayoría de los LV evaluados, excepto de L. gasseri CRL 1259. L. salivarius CRL 1328, L. acidophilus CRL 1266 y L. paracasei CRL 1289 mostraron la mayor diferencia entre el número inicial y el número máximo de células viables en MSFV (aproximadamente 1 unidad log después de 7 ó 24 h de incubación). Estos LV produjeron también los pH finales mas bajos (3,80 ± 0,10 a las 72 h de cultivo). La producción de sustancias antagónicas por LV en MSFV fue variable. Bajo las condiciones de cultivo evaluadas, L. johnsonii CRL 1294 mantuvo su capacidad de auto-agregación, determinada en buffer fosfato salino a pH 7, y en buffer acetato a pH 4,5. Los LV fueron capaces de crecer o sobrevivir en un medio de cultivo formulado para simular la composición del fluido vaginal, a 37°C y a un pH similar al de la vagina humana sana. Estos resultados permitirán evaluar la preadaptación de los microorganismos benéficos a condiciones fisiológicas similares a las del tracto a aplicar, y de esta manera, considerar las posibilidades de su inclusión en productos farmacéuticos de aplicación vaginal .