Bajos Niveles de Colesterol Celular Incrementan el Efecto de Lactobacillus reuteri CRL 1098 Sobre la Producción de TNF-Alfa.

M. A. SORIA; FONT DE VALDEZ, G.; RODRÍGUEZ, A. V.

San Miguel de Tucumán

Congreso; II Simposio Internacional de Bacterias Lácticas. Primer Encuentro Red BAL Argentina.; 2006

Los microdominios conocidos como rafts lipídicos presentes en la membrana plasmática de las células eucariotas se caracterizan por su alto contenido en colesterol, esfingolípidos y GPI-proteínas. Estos microdominios son sitio de localización de numerosos receptores y coordinan la inducción de la transducción de señales. Además, constituyen el sitio blanco de diferentes microorganismos para controlar la respuesta celular.El objetivo de este trabajo fue investigar el efecto de  L. reuteri CRL 1098 sobre la producción de TNF-alfa  por células mononucleares de sangre periférica (CMSP). Se estudió y caracterizó la respuesta de CMSP con rafts lipídicos modificados por disminución del colesterol celular.El contenido de colesterol de las  CMSP fue disminuido por tratamiento con metil-beta-ciclodextrina (MBetaCD) 10 mM y  determinado mediante Filipin. Las CMSP controles (sin tratamiento) y con colesterol disminuido  fueron incubadas en presencia de L. reuteri a distintas  relaciones de multiplicidad de infección ( MDI= UFC/Nº de células) y tiempos de incubación. En algunos ensayos CMSP fueron incubadas en las fraccciones obtenidas por ultrafiltración del cultivo de L. reuteri en membranas Centricon de 10 kDa:  fracciones I (moléculas <10 kDa) y II (moléculas >10 kDa). TNF-alfa fue determinado en los sobrenadantes de los cultivos de CMSP-L. reuteri y CMSP-fracción I o II, por  quimioluminiscencia. El valor obtenido de TNF-alfa fue de 149 pg/célula.  En las células controles incubadas en presencia de L. reuteri a 20 MDI durante 4 h, se observó una disminución de la producción de TNF-alfa del 27%, y esta reducción  fue del  51% en las CMSP con colesterol disminuido. En las CMSP incubadas en la fracción de sobrenadante I  se observó un 41% y 63% de disminución de TNF-alfa producido por las células controles y con colesterol disminuido, respectivamente, mientras que cuando fueron enfrentadas con la fracción II no se observó modificación en los valores de TNF-.