Producción e inhibición de biofilm en cepas de Klebsiella aisladas de cateteres urinarios

SILVA CLARA,; MALDONADO NATALIA; NADER-MACIAS ME; MARTA CECILIA

Mendoza

Jornada; Reunión de la Asociación Argentina de Microbiología.; 2006

Asociacion Argentina de Microbiologia

PRODUCCIÓN E INHIBICIÓN DE BIOFILM EN CEPAS DE KLEBSIELLA AISLADAS DE CATETERES URINARIOS. Silva C; Maldonado N; Nader F; Cecilia M. Cátedra de Bacteriología. F. de Bioquímica, Química y Farmacia UNT. Ayacucho 491.CP 4000. Tucumán. Argentina    Klebsiella (Kb) asociadas a catéteres en infecciones urinarias constituyen un serio problema; constituyen reservorios nosocomiales y ejercen su virulencia mediante la formación de biofilm y por ello  resistencia  a los antibióticos. El objetivo fue identificar cepas de Kb aisladas de catéteres, estudiar la capacidad de producir biofilm y su inhibición por una cepa de lactobacilo (LAB). Se aislaron e identificaron por métodos convencionales realizando la fermentación de azúcares  en  microtécnicas. La producción de biofilm se efectuó con 20 cepas de Kb en microplacas, se agregó cristal violeta  por 15 min, se aspiró el  colorante, se agregó 200 µl de etanol y se leyó densidad óptica (DO). Se consideraron productoras de biofilm  las cepas con DO >0.100. Se estudió  la inhibición de  formación de biofilm por LAB frente a  4 cepas de Kb productoras. Un cultivo activo de LAB se centrifugó, una parte del sobrenadante se neutralizó.  En  policubeta  se colocaron 100 y 150 µl  de Kb y se completaron hasta  200 µl con células  de LAB, con sobrenadante ácido y con neutro. Se incubó 4 hs a 37º C y se efectuaron recuentos bacterianos al comienzo y al final de cada  experiencias, midiendo la DO.  De las cepas estudiadas se identificaron K.  pneumoniae subs pneumoniae (45%),   K. oxytoca (39%) y K. planticola (20%). Fueron productoras de biofilm 5 cepas de K. pneumoniae subs pneumonie y 1 K. planticola con DO >0.500;  4  K. planticola, 5 K.  pneumoniae subs pneumoniae  y 3  K. oxytoca  entre 0.100 y 0.500. La inhibición  total de la formación de biofilm y disminución del crecimiento entre 3 y 7 log  se observó con 100 µl de LAB o sobrenadante y 100  µl  de Kb. Debido a que la prevención es un desafío con estos resultados se podrían establecer nuevas estrategias potenciales.