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RESISTENCIA A CONDICIONES GASTROINTESTINALES DE BACTERIAS LÁCTICAS VAGINALES BOVINAS Y AISLADAS DE HECES DE TERNEROS LACTANTES Maldonado Natalia, Otero MC, Nader-Macias, M.E. CERELA-CONICET. Chacabuco 145. 4000 S. M. de Tucumán. E-mail: fnader@cerela.org.ar Las bacterias lácticas (BL) forman parte de la microbiota indígena del tracto urogenital y gastrointestinal (GI) de mamíferos. En el tracto urogenital varían según los ciclos estrales, y en el tracto GI, los mayores niveles se detectan durante la lactancia y se estabilizan a medida que el animal comienza a ingerir sólidos. Las BL del tracto urogenital son las que contactan inicialmente con el neonato durante el nacimiento, y se postula que son las primeras en colonizar su tracto GI. Durante los primeros días de vida, es común la aparición de diarreas neonatales de etiología vírica y bacteriana, las cuales producen grandes pérdidas económicas debido a su alta tasa de mortalidad. La utilización de probióticos, en especial conteniendo BL, está cada vez mas difundida en la práctica veterinaria. Dado que nuestro grupo se dirige al diseño de productos probióticos preventivos para el ganado bovino, el objetivo de este trabajo fue aislar BL de heces de terneros entre cero y cuatro meses de edad, evaluar su resistencia a las condiciones gastrointestinales, y compararlas con el comportamiento de BL vaginales bovinas seleccionadas previamente por sus características probióticas. Las BL fueron aisladas y cuantificadas de heces de animales en buen estado de salud, empleando medios selectivos y diferenciales (LAPTg, Mc Conkey, MRS, LBS y SBC (Selectivo para Bacillus cereus). La identificación taxonómica se realizó por pruebas fenotípicas estandar. La resistencia a las condiciones del medio ambiente gastrointestinal se evaluó en 7 cepas de vagina bovina y 7 cepas de heces a pH 3, 4 y 6.5 y a diferentes concentraciones de sales biliares (0,5%, 1%, 2%, 3% y 4%) simulando las condiciones in vitro de los pre-rumiantes. Se aislaron 74 cepas de BL a partir de 36 muestras de heces, con un número de 107 y 108 UFC de aerobios, siendo predominante el grupo de enterobacterias (106-107 UFC) y BL (106-107 UFC). La evaluación de la resistencia a sales biliares demostró que la mayoría de las cepas es resistente a oxgall al 1% (excepto una de origen bovino fecal). Dos cepas (una vaginal y una de heces) resultaron resistentes a sales biliares al 4%. Ninguna de las cepas es capaz de crecer a pH 3, seis cepas crecen a pH 4, siendo la mitad de ellas de origen vaginal. Al ser sometidas a estrés ácido durante una hora a pH 3 y pH 4, y ser luego transferidas a medios con sales biliares, la mayoría de las cepas crece con 1% de oxgall, mientras que dos cepas lo hicieron con 2%. Los resultados obtenidos permitirán continuar con los estudios de selección de microorganismos benéficos. La combinación de bacterias probióticas seleccionadas tanto de vagina bovina como de heces de terneros recién nacidos, permitirá su empleo para el diseño de un producto para la prevención de diarreas en los primeros estadios de vida del ternero. RESISTENCE TO GASTROINTESTINAL CONDITIONS OF VAGINAL BOVINE LACTIC ACID BACTERIA AND ISOLATED FROM FAECES OF CALVES Maldonado Natalia, Otero MC, Nader-Macias, M.E. CERELA-CONICET. Chacabuco 145. 4000 S. M. de Tucumán. E-mail: fnader@cerela.org.ar Lactic Acid Bacteria (LAB) are part of the indigenous microbiota of the urogenital and gastrointestinal (GI) tracts of mammals. In the urogenital tract they are modified according to the estral cycles, and in the GI tract, the higher levels are detected during lactation, being stable while the animal is growing. The urogenital BAL are the first in contact with the calves, during the birth, being postulated that they are the responsible of the GI colonization of the neonate. During the first days of life, the neonatal bacterial or viral diarrhea are of main incidence, producing economic losses by the high rate of mortality. The application of probiotics containing LAB, is widely difunded in the veterinary area. Our research group works in the design of preventive probiotic products for cows, then the objective of this work was to isolate LAB from faeces of newborn calves to 4 month age, to evaluate their resistance to the GI conditions and to compare with the behaviors of bovine vaginal LAB previously selected by their probiotic characteristics. The BAL were isolated and quantified from faeces of healthy calves, by using selective and differential culture media ((LAPTg, Mc Conkey, MRS, LBS y SBC (Selective for Bacillus cereus). The taxonomic identification was carried out by estandar phenotypic assays. The resistance to the GI environment was evaluated in 7 strains from bovine vagina and in 7 strains from faeces at pH 3, 4 and 6.5, and to different concentration of bile salts (0,5%, 1%, 2%, 3% and 4%) simulating the in vitro conditions of the pre-ruminants. 74 strains of LAB were isolated from 36 faeces samples, in numbers between 107 and 108 CFU of aerobic microorganisms, being predominant the group of enterobacteria (106-107 CFU) and LAB (106-107 CFU). The evaluation of the resistance of bile salts showed that the majority of the strains are resistant to 1% oxgall (except one strain from faeces). Two strains (one vaginal and one from faeces) were resistant to 4% oxgall. Any of them was able to grow at pH 3, six strains grew at pH 4, being the half of the from vaginal origin. When they were subjected to acid stress for one hour at pH 3, and later transferred to media with bile salts, the majority of the strains were able to grow in 1% oxgall, and two strains grew at 2% oxgall The results obtained will allow to continue with the selection of beneficial microorganisms. The combination of probiotic bacteria selected from both, bovine vagina and faeces from newborn calves could be applied for the design of a product for the prevention of newborn diarrea.