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La mastitis bovina es responsable de pérdidas económicas en tambos del mundo, siendo la terapia al secado con antibióticos la práctica más utilizada. En este trabajo, se estudió el efecto in vivo de la inoculación de Lactobacillus perolens CRL1724 en el tejido mamario bovino. Se utilizaron dos vacas Holando-Argentino de descarte en período seco y clínicamente sanas. Una fue utilizada para determinar la concentración máxima que no produjera inflamación de la glándula mamaria. Tres cuartos se inocularon con 1ml de 103, 106 y 109 UFC/ml y uno fue usado como control. El otro animal se utilizó para el análisis histológico. Tres cuartos fueron inoculados con 1ml de 106 UFC/ml de lactobacilos dejando uno control. Diariamente se registraron signos clínicos en ubres (durante 7 días), se recolectaron muestras individuales de leche y se realizaron determinaciones de recuento de células somáticas (RCS), bacteriología y recuperación de lactobacilos. Para el análisis histológico muestras de tejido epitelial fueron removidas y fijadas en formalina, y glutaraldehído para microscopía electrónica de transmisión (MET). Los resultados mostraron que 106 UFC/ml de lactobacilos no produjo signos clínicos de inflamación en la ubre ni cambios en la apariencia de la leche. Cuartos inoculados con 106 UFC/ml presentaron aumento del RCS dos veces superior respecto al control (durante 48h) volviendo a recuentos normales (2x105 células/ml) al final del ensayo. L. perolens CRL1724 se recuperó en todos los cuartos inoculados hasta el final del ensayo y ningún patógeno de mastitis fue aislado. Los cortes del canal no mostraron diferencias histológicas entre cuartos inoculados y no inoculados y presentaron vasos sanguíneos vacíos y ausencia de bacterias. El tejido de la cisterna mostró presencia de polimorfonucleares en la zona epitelial, hiperemia en vasos sanguíneos y adherencia de lactobacilos. Estos resultados fueron confirmados por MET. En conclusión, L. perolens CRL1724 mostró adherencia in vivo a la cisterna del pezón de vacas en período seco, sin causar modificaciones o daños en células del canal y la cisterna del pezón. Este estudio proporciona información para la utilización de esta cepa en el diseño de un producto probiótico para prevenir la mastitis bovina en vacas al secado.