PERFIL DE CITOQUINAS Y EXPRESIIN DE MARCADORES CELULARES INDUCIDOS POR BACTERIAS LACTICAS ASOCIADAS A UN Ag NEUMOCCOCICO EN MODELO “IN VITRO” DE CELULAS HUMANAS.

VINTIÑI ELISA; GONSALEZ, LAURA; MEDINA MARCELA

San Juan

Congreso; II REUNION CONJUNTA DE SOCIEDADES DE BIOLOGÍA DE LA REPÚBLICA ARGENTINA.; 2011

Sociedad Argentina de Biología

Perfil de citoquinas y expresión de marcadores celulares inducidos por bacterias lácticas asociadas a un Ag neumoccócico en modelo “in vitro” de células humanas. Vintiñi Elisa, Gonzalez Laura, Medina Marcela Streptococcus pneumoniae (Sp) representa un serio problema de salud a nivel mundial. Algunas proteínas serotipo independientes del patógeno constituyen un blanco importante para el desarrollo de nuevas vacunas. En estudios previos, la Proteína Protectora A (PppA) de neumococo fue expresada en Lactococcus lactis: LL-PppA. La cepa recombinante fue efectiva en la inducción de inmunidad protectora contra el patógeno en modelo animal. Además, se demostró que Lactobacillus casei (Lc) estimuló la respuesta inmune innata y adaptativa del huésped frente al desafío con Sp en ratón. Los modelos animales son una valiosa herramienta de investigación, sin embargo la realización de estudios en cultivos primarios de células humanas, representa un avance para la ejecución a corto plazo, de estudios clínicos en humanos. Objetivo: Evaluar el efecto de bacterias lácticas (BL) empleadas como vectores de un Ag neumoccócico (LL-PppA) o como adyuvantes (Lc), sobre la inducción de citoquinas y la expresión de marcadores celulares (MC), en células mononucleares de sangre periférica humana (CMSP). Para ello, las CMSP de adultos sanos, fueron cultivadas durante 24 horas (37ºC, CO2 5%) en presencia de: 1) LL-PppA, 2) LL, 3) Lc viable, 4) Lc muerto, 5) PppA, 6) PppA+LcV, 7) PppA+LcM y 8) PBS (Control:C). Se mantuvo una relación 1:1 entre BL y CMSP. Determinaciones: 1) Citoquinas Th1 (IL-2, INF-γ), Th2 (IL-4, IL-10) y Th 17 (IL-17) en sobrenadante de cultivo por ELISA; 2) MC: Linfocitos T (LT: CD3+, CD4+, CD8+), LB (CD19+) y CD86+, por Citometría de Flujo. Ninguno de los grupos experimentales evaluados mostró diferencias significativas en la expresión de MC de LT en comparación con el control (PBS=CD3+:66±6, CD4+:38±5, CD8=23±5). En contraste, los grupos PppA+LcV, PppA+LcM, LL-PppA y LPS indujeron aumentos significativos en la expresión de CD19+ en comparación al control. Algunos tratamientos aumentaron la expresión de CD86+, pero sin diferencias significativas con el C. LL-PppA, PppA+LcV y PppA+LcM indujeron los niveles más elevados de IL-10, IL-17, INF-γ en nuestro modelo. La estimulación de CMSP con PppA asociada a BLs como vectores o adyuvantes, indujo la producción de citoquinas por los LT y la expresión del marcador de LB, estimulando tanto la inmunidad celular como humoral.