PRODUCCION DE BIOFILM EN BACTERIAS LACTICAS VAGINALES CON PROPIEDADES BENEFICAS

MARIA CECILIA LECCESE TERRAF; MARIA SILVINA JUAREZ TOMAS; MARIA ELENA FÁTIMA NADER; CLARA SILVA DE RUIZ

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiología. VI Congreso de la Sociedad Argentina de Bacteriología, Micología y Parasitología Clínica (SADEBAC). I Congreso de Microbiología Agrícola y Ambiental (DiMAyA); 2010

ASOCIACION ARGENTINA DE MICROBIOLOGIA

Introducción: Los lactobacilos son los microorganismos predominantes del tracto vaginal y participan en el mantenimiento del equilibrio ecológico del tracto. Muchos de ellos exhiben propiedades benéficas que protegen del ingreso de microorganismos patógenos, entre las que se incluye la formación de biofilm, lo que favorecería su colonización y establecimiento para mantener la salud del tracto. Objetivo: En trabajos previos se han aislado, identificado y seleccionado bacterias lácticas vaginales (BLV) con propiedades benéficas,  por lo que el objetivo de este trabajo fue evaluar su capacidad de formar biofilm en varios medios de cultivo. Materiales y Métodos: Se trabajó con siete cepas de BLV que fueron desarrolladas en caldo MRS a 37ºC durante 14 horas y subcultivadas en diferentes medios: MRS caldo completo, MRS sin glucosa, MRS sin Tween 80 y MRS sin MnSO4. Una vez alcanzada la fase estacionaria de crecimiento, se tomaron 200 µL de cada uno de los cultivos, los que se diluyeron en 5mL de los respectivos medios. Alícuotas de 200 µL se transfirieron a microplacas de poliestireno estériles, las que se incubaron 72 horas a 37ºC. Para la cuantificación del biofilm se aplicó la técnica de Cristal Violeta, determinándose la densidad óptica (DO) del colorante disuelto a 570 nm, en un lector de microplacas. Las determinaciones se realizaron por cuadruplicado y el ensayo completo se repitió dos veces. Resultados: De las siete cepas estudiadas, sólo tres mostraron un perfil de formación de biofilm moderado o fuerte, dependiendo del medio de cultivo empleado. Lactobacillus reuteri CRL 1324 (que inhibe a uropatógenos por ácidos orgánicos) fue la cepa mayor productora de biofilm  en  MRS completo y MRS sin Tween 80. Bajo estas condiciones de cultivo, el perfil de adhesión fue moderado o fuerte (DO= 0,20 y DO= 1,44, respectivamente). L. rhamnosus CRL 1332 y L. delbrueckii CRL 1510 (productores de peróxido de hidrógeno) presentaron una producción moderada de biofilm en ausencia de Tween 80 (DO=0,37 y DO=0,30, respectivamente). En ninguno de los microorganismos evaluados se detectó formación de biofilm al no estar presente glucosa o MnSO4 en el medio de cultivo base. Conclusiones: La ausencia del agente tensioactivo Tween 80 favoreció la producción de biofilm en algunas cepas de BLV. Los resultados de este trabajo permiten avanzar en la optimización de las condiciones y factores que afectan la formación de biofilm, para luego evaluar la capacidad de BLV de inhibir la colonización de microorganismos patógenos u oportunistas en el tracto vaginal.