PROIMI   05436
PLANTA PILOTO DE PROCESOS INDUSTRIALES MICROBIOLOGICOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
XylCLEAs inmovilizados en nanopartículas magnéticas, diseñadas a partir de proteína amiloidea
Autor/es:
PEROTTI NI; HERO JS; MARTINEZ MA; MORALES AH; ROMERO CM
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Simposio; XIX Encuentro de Superficies y Materiales Nanoestructurados.; 2019
Institución organizadora:
Comité Nacional de Reuniones NANO
Resumen:
La inmovilización es una manera de incrementar la vida útil de los biocatalizadores por estabilización de los mismos y por la posibilidad de reutilización en varios ciclos. Dentro de los métodos de inmovilización, una de las técnicas atractivas por simplicidad y costo es la producción de agregados enzimáticos entrecruzados o CLEAs (cross-linked enzyme aggregates), como enzimas inmovilizadas libres de soporte. Sin embargo, para muchos sustratos insolubles la separación de estos agregados por filtración y/o centrifugación resulta ineficiente, por lo tanto, la inmovilización con nanopartículas magnéticas (MNPs) resulta en un método de fácil recuperación. El objetivo del presente trabajo es analizar los factores que conforman la matriz de inmovilización de enzimas del tipo glicósido-hidrolasa, en la formación de XylCLEAs magnéticos, con el propósito de maximizar la actividad catalítica sobre sustratos naturales (xilano de birchwood). Se empleó el catalizador optimizado según Hero y col. [1], y se aplicó un diseño superficie en respuesta con los siguientes factores: relación MNPs Fe3O4 5, 10 y 20 mg por mg de proteínas presente en el sobrenadante libre de células; porcentaje de saturación del (NH4)2SO4 (60%, 80% y 100%); y el tipo de agente entrecruzante empleado en la matriz, glutaraldehído (GA) 0,025% (p/v), o un complejo de biopolímero-proteína amiloidea (BPPA) producido a partir del biofilm de Bacillus sp. Mcn4 0,025% (p/v), sometido a un tratamiento oxidativo. La respuesta evaluada fue actividad xilanolítica [1]. El análisis estadístico del modelo empleado resultó en un R2adj. del 97%, validando el diseño. Todos los factores evaluados tuvieron un efecto significativo (p