CARACTERIZACION DEL PROTEOMA INTRACELULAR DE Gluconacetobacter diazotrophicus PAL5 REGULADO POR QUORUM SENSING

ELISA V. BERTINI; VERÓNICA P. IRAZUSTA; CARLOS G. NIETO PEÑALVER

Congreso; AUGM; 2012

Las bacterias regulan procesos fisiológicos por mecanismos conocidos como quorum sensing (QS) caracterizados por la producción de moléculas señal. Gluconacetobacter diazotrophicus PAL5, microorganismo de importancia biotecnológica, sintetiza acil homoserin lactonas (AHLs) como moléculas señal. El objetivo de este trabajo fue estudiar el proteoma  intracelular de G. diazotrophicus PAL5 regulado por QS mediante una estrategia de quorum quenching. En G. diazotrophicus PAL5 se introdujo por conjugación triparental el plásmido pME6863 que codifica una enzima lactonasa que permite la hidrólisis de AHLs. Extractos de cultivos se analizaron con bioensayos y cromatografías en capa fina revelados con Agrobacterium tumefaciens NTL4 (pCF372) (pCF272) y Pseudomonas putida F117 (pKR-C12). El estudio de las proteínas intracelulares se realizó por electroforesis mono y bidimensional en geles de poliacrilamida. En los extractos de cultivo de PAL5 (pME6863) no se detectaron AHLs, confirmándose la inactivación del sistema de QS por quorum quenching. El análisis de los geles mostró que 31 proteínas intracelulares diferían en su expresión. 11 proteínas se expresaron en menor nivel y 2 se sobreexpresaron en PAL5 (pME6863), mientras que 6 proteínas se encontraron ausentes. Este estudio sugiere que  la expresión de proteínas intracelulares es regulada por el sistema de QS de G. diazotrophicus PAL5.