BIODEGRADACIÓN DE CLORDANO POR ACTINOMYCETES AISLADOS DE SUELOS CONTAMINADOS

BOURGUIGNON, N.; CUOZZO, S.A.; FUENTES, M.S.,; BENIMELI, C.S.; AMOROSO, M.J.

BUENOS AIRES

Congreso; XII CONGRESO ARGENTINO DE MICROBIOLOGIA; 2010

SOCIEDAD ARGENTINA DE MICROBIOLOGÍA

Introducción El clordano (CLD) es un plaguicida organoclorado (PO) ampliamente utilizado con fines agrícolas o domésticos. El CLD técnico es una mezcla de más de 140 compuestos, prevaleciendo los isómeros a-clordano (a-CLD) y g-clordano (g-CLD). Actualmente su uso está prohibido debido a su toxicidad, persistencia ambiental, biomagnificación y bioacumulación en la cadena alimentaria; sin embargo aún es detectado en la biósfera. La biorremediación es una alternativa “eco-amigable” para la recuperación de sitios contaminados con esta clase de xenobióticos y hasta el presente no hay reportes sobre la biodegradación aeróbica de CLD por actinomycetes. Los actinomycetes son bacterias aeróbicas que por su diversidad metabólica y ubicuidad en el medio ambiente, pueden considerarse como microorganismos adecuados para llevar a cabo los procesos de biorremediación. Objetivo Optimizar la degradación de CLD en medio de cultivo mínimo por actinomycetes autóctonos. Materiales y Métodos. Identificación molecular. Se amplificó el ADNr 16S de los actinomycetes designados A2, A5, A6, A13, previamente aislados a partir de suelos contaminados con POs de la localidad de Argentina, provincia de Santiago del Estero. A partir de las secuencias obtenidas se construyó un árbol filogenético. Selección del actinomycete más eficiente para la degradación de CLD. Se estudió el crecimiento de los aislamientos seleccionados, además de las cepas Streptomyces sp. M7 y S. coelicolor A3, en medio mínimo (MM) adicionado con 1,66 mg L-1 de CLD técnico como única fuente de carbono. Los cultivos se incubaron a 30 ºC y 200 rpm durante 7 días. Se determinó crecimiento microbiano (peso seco), g-CLD residual (cromatografía gaseosa) y liberación de iones cloruros (espectrofotometría). Optimización de los parámetros de degradación. Los aislamientos seleccionados se cultivaron a 25, 30 y 35 ºC; pH iniciales de 5, 7 y 9 y en concentraciones de 1,66; 8,30 y 16,60 mg L-1 del PO. Se determinó crecimiento microbiano, g-CLD residual y cloruros liberados. Resultados. Los actinomycetes A2, A5, A6, A13 presentaron un porcentaje de identidad comprendido entre el 96,7 y 98,7% con la cepa de colección S. odorifer DSM 40347, por lo tanto se los consideró pertenecientes al género Streptomyces. Todos los microorganismos analizados presentaron las máximas remociones de g-CLD (98,0 y 99,8%) al primer día de incubación. Se seleccionó el aislamiento A5 como el más promisorio para la biodegradación de CLD por presentar la mayor producción de biomasa (0,29 mg mL-1), el menor tiempo de duplicación (6,44 h) y elevadas capacidades de remoción de g-CLD (99,8%) y de liberación de iones cloruros (DA540=0,11). El actinomycete A5 demostró una remoción del 99% para g-CLD cuando se cultivó en todas las temperaturas y pH iniciales evaluados. Cuando se suplementó el MM con una concentración inicial de 16,60 mg L-1 de CLD, el aislamiento A5 fue capaz de crecer con g-CLD como única fuente de carbono y energía y de remover el 99,6% del plaguicida del medio de cultivo. Conclusiones. Estos resultados permiten postular a Streptomyces A5 como potencial agente para la biorremediación de sitios contaminados con CLD, por su eficiencia para la degradación de este compuesto en diferentes condiciones ambientales y con elevadas concentraciones del plaguicida.