Las raíces de mandioca (Manihot esculenta Crantz) son capaces de crecer aisladas de la planta mediante cultivo in vitro

RICARDO DANIEL MEDINA; M FALOCI; LA MROGINSKI

UNNE - Campus Resistencia

Congreso; 13ra. Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas; 2009

SGCyT-UNNE

La escasez de estudios de los órganos subterráneos puede deberse a la dificultad que representa la exploración del medio en el cual normalmente crecen (el suelo), a la inadecuada preservación de la integridad de los mismos y al bajo nivel de sincronía en su formación bajo condiciones de campo o en maceta. Para ello, durante años se han desarrollado una amplia variedad de técnicas para observar, medir y analizar el crecimiento y desarrollo de las raíces, entre ellas el cultivo de tejidos. Este método considerado artificial, no es necesariamente destructivo y primordialmente permite llevar a cabo estudios en condiciones nutricionales y ambientales controladas y homogéneas. En la bibliografía se ha demostrado ampliamente que mediante el cultivo in vitro de tejidos es posible lograr la formación de órganos subterráneos, con una alta frecuencia de formación y sincronización del proceso, aunque es necesario su puesta a punto para cada especie en estudio. Las raíces aisladas de mandioca fueron cultivadas directamente en medio sólido (S) ó líquido (L), ó mediante una técnica de alimentación basal en donde la porción basal del segmento de raíz (2 cm) fue cultivada en un tubo con medio sólido (adherido a una tapa rosca que obturaba un frasco contenedor de medio sólido o líquido) de tal manera que su porción apical permaneciera en contacto con el medio contenido en el frasco (sistema S/S ó S/L). Al cabo de 37 días, el sistema que propició las mejores respuestas de longitud total de las raíces aisladas, peso fresco (PF) y seco (PS) fue el S/L. Una vez seleccionado el sistema de cultivo S/L se ensayaron distintos medios. En el tubo suspendido, se utilizó como medio basal MS con 5% de sacarosa, variando el tipo de auxinas (ácido naftalenacético -ANA y ácido indolacético -AIA) y su concentración (0,1; 1 y 2 mg/L) en combinación con 0,1 mg/L de 6-bencilaminopurina (BAP). En el frasco siempre se empleó MS con 3% de sacarosa. En todos los casos hubo crecimiento de raíces, considerando la longitud, PF y PS individuales, siendo en algunos casos significativamente distintos comparados con el medio de Torrey y Loomis, 1967 (MS 8% sacarosa + 1,75 mg/L AIA + 0,1 mg/L BAP) usado para el cultivo de raíces aisladas de rabanito . En ninguno de los casos, fue posible observar raíces notablemente engrosadas que se pudieran considerar como tuberosas. Sólo con las mayores concentraciones de AIA se evidenció un leve engrosamiento en la porción basal de las raíces. Se formaron raíces laterales sólo en los sistemas con medios líquidos. Fue factible el crecimiento in vitro de raíces aisladas de mandioca mediante la aplicación de una técnica de alimentación basal. Dicha técnica ofrece una herramienta biotecnológica reproducible y eficiente, ideal para realizar estudios básicos de morfología y anatomía (producción de raíces tuberosas y fibrosas; arquitectura radical), fisiología  (estudios hormonales y de nutrición) y bioquímica (análisis enzimáticos y moleculares), así como para la producción de metabolitos primarios (almidón) y secundarios (glucósidos cianogéncios) en condiciones controladas.