Efecto del contenido de nitrógeno total y la relación de las proporciones iónicas NO3-/NH4+ en el medio de cultivo sobre la organogénesis de Pinus taeda

ESPASANDIN, FABIANA D; BARONE, JAVIER; LUNA, CLAUDIA V; OBERSCHELP, JAVIER

Bahia Blanca

Simposio; XI SIMPOSIO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA; 2017

REDBIO

Uno de los nutrientes más importantes en el cultivo in vitro es el nitrógeno (N), así como la relación entre el nitrato (NO3-) y amonio (NH4+); siendo en general más importante la relación entre estas dos formas iónicas, que la concentración de N total en el medio. En coníferas, para procesos organogénicos los medios de cultivo más efectivos contienen elevados niveles de sales y suministran N tanto como NH4+ y/o NO3-. Las proporciones iónicas de NO3-/NH4+ y la cantidad de N total en un medio de cultivo necesitan ser optimizada para cada material genético, condiciones de crecimiento y tipo de tejido a ser cultivado. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del contenido de N total y la relación de las proporciones iónicas NO3-/NH4+ en el medio de cultivo sobre la formación de yemas adventicias vía organogénesis a partir de embriones cigóticos maduros de Pinus taeda. Se utilizó el medio basal Murashige y Skoog diluido a la mitad de su concentración (MS/2), modificado con el objetivo de evaluar tres concentraciones de N (10, 20 y 30 mM) y tres relaciones iónicas de NO3-/NH4+ (1:1, 2:1 y 3:1). Se complementó el medio basal con 0,1 mg.L-1 de bencilaminopurina (BAP) y 0,1 mg.L-1 de thidiazuron (TDZ). A los 35 días de incubación se determinó: porcentaje de regeneración, de oxidación, de formación de callos, número de yemas/explante regenerado, índice de capacidad de formación de yemas (BFC) y la relación entre el número de yemas regeneradas a partir del hipocótilo y de los cotiledones. El diseño experimental fue completamente aleatorizado con 5 repeticiones por tratamiento. La unidad experimental estuvo compuesta por 10 embriones. Los resultados fueron analizados estadísticamente mediante análisis de varianza. La organogénesis estuvo influenciada por la concentración de N observándose una relación inversa entre ambas variables. La oxidación de los embriones fue directamente proporcional a la concentración de N. La producción de callos fue menor a bajas concentraciones de N. El número de yemas/explante fue superior en los tratamientos de baja relación NO3-/NH4+, disminuyendo en mayor proporción sobre la región del hipocótilo que la de los cotiledones al aumentar la relación NO3-/NH4+. El índice BFC fue superior a menores concentraciones de N y menor relación NO3-/NH4+; esto se debe a que dicho índice es calculado a partir de la tasa de regeneración de yemas y el número de yemas/explante, ambas variables favorecidas por dichos tratamientos. Estos resultados indican que son necesarios bajos niveles de N total, así como una baja relación NO3-/NH4+ en el medio de cultivo, para optimizar la organogénesis in vitro de P. taeda.