INFERENCIAS SOBRE LA EVOLUCIÓN DE LA HETEROCROMATINA PERICENTROMÉRICA EN ARACHIS

CHALUP L; SAMOLUK SS; SEIJO JG; ROBLEDO G.

CORRIENTES

Congreso; II REUNIÓN ARGENTINA DE BIOLOGÍA EVOLUTIVA; 2017

INTRODUCCIÓNLas regiones heterocromáticas de los genomas eucariotasestán compuestas principalmente por diferentes familias de ADN satélite(ADNsat). Usualmente, estas secuencias muestran una elevada dinámica evolutivaque conduce a perfiles específicos de especie, aún entre especies estrechamenterelacionadas. Las especies diploides 2n=2x=20 incluidas en la sección Arachis (géneroArachis) fueron asignadas a seisgenomas diferentes (A, B, D, F and K), cuya diferencia cariotípica más notable esla cantidad y distribución de la heterocromatina pericentromérica DAPI+.En este grupo, la familia de ADN satélite ATR-2 es el componente principal dela heterocromatina pericentromérica de las especies con genomas A, F y K, perono de aquellas con genomas D y B. Con el objetivo de inferir los cambios en la composiciónde estas regiones cromosómicas ocurridos durante la diferenciación genómica, eneste trabajo se realiza la caracterización de la familia de ADNsat másabundante en el genoma de A. glandulifera(genoma D), y se analiza su distribución cromosómica en las especies diploides A. glandulifera, A. duranensis (genoma A) y A.ipaënsis (genoma B).MATERIALES Y MÉTODOSA partir de la secuenciaciónuna biblioteca de ADN genómico de A.glandulifera KSSc30099 (IlluminaMiSeq) se realizó la identificación de novo de secuencias de ADNsat utilizandoel programa RepeatExplorer. El análisis de la distribución de las secuenciascaracterizadas sobre metafases mitóticas de las especies A. glandulifera, A.duranensis y A. ipaënsis serealizó mediante hibridación in situfluorescente (FISH). RESULTADOSSe identificaron tres familias de ADNsat en el genoma de A. glandulifera: Agla_CL8sat,Agla_CL39sat y Agla_CL69sat. De las tres familias, la primera fue la másrepresentada abarcando aproximadamente el 2,5% del genoma. Las familiasrestantes mostraron una abundancia muy baja y, por tanto, no fueron incluidasen los análisis posteriores. La comparación de la secuencia consenso de lafamilia Agla_CL8sat con secuencias depositadas en bases de datos públicas revelóun 75% de identidad con miembros de la familia ATR-2. Experimentos de FISH revelaronque Agla_CL8sat se distribuye en la mayoría de las bandas heterocromáticas DAPI+de A. glandulifera (6 pares de bandas),mientras que por el contrario en sólo dos pares de bandas pequeñas en A. ipaënsis y en ninguna de A. duranensis.   DISCUSIÓNA través de la combinación del análisis bioinformático yexperimentos de FISH se logró identificar la familia de ADNsat más abundante enel genoma de A. glandulifera, la cualsería el componente principal de la heterocromatina pericentromérica del genomaD, pero no de los genomas A y B. El análisis de identidad evidenció que si bienAgla_CL8sat y ATR-2 pertenecen a la misma superfamilia, son miembros dediferentes familias de ADNsat. El conjunto de resultados obtenidos sugiere quela evolución de la heterocromatina pericentromérica en los diferentes genomas habríaimplicado cambios en los perfiles de de diferentes familias de ADNsat. Por lotanto, la mera presencia de heterocromatina pericentromérica DAPI+en estos genomas no puede ser concebida como un carácter homólogo y que, paraser considerada como tal entre taxones más o menos distantes, se requiereinformación acerca de las secuencias que la componen.AGRADECIMIENTOSAgradecemos la colaboración de los Dres. Scott Jackson y David Bertiolidel ?Center of Applied Genetic Technologies, University of Georgia (Athens,Georgia- USA)?.