Optimización de un procedimiento para la organogénesis directa de Pinus elliottii var. elliottii x Pinus caribaea var. hondurensis

LUNA CLAUDIA; SANSBERRO PEDRO; AYALA LILIAN PATRICIA E.; GAUCHAT MARIA ELENE

Bahia Blanca

Simposio; XI Simposio Nacional de Biotecnología; 2017

REDBIO Argentina

Las ventajas técnicas e industriales queofrece el empleo de las generaciones F1 y F2 de P. elliottii var. elliottii× P. caribaea var. hondurensis en relación a sus parentalesindividuales e incluso al P. taeda, especie predominante en la región,han despertado el interés en el sector foresto-industrial. Así, en el 2004 seincorpora esta nueva entidad productiva al Programa de Mejoramiento GenéticoForestal, con el objetivo principal de generar material local y mejorarlo paraser transferido a productores forestales; en el mismo se contempla como unobjetivo particular el desarrollo de protocolos de propagación vegetativa através de técnicas de micro- y/o macro-propagación. La definición de unprotocolo óptimo de micropropagación implica el hallazgo de la combinaciónadecuada de factores como medio basal, tipo de explante, tipo y concentraciónde hormonas, condiciones de luz, entre otros. Por ello, el objetivo de este trabajofue evaluar e identificar la influencia de factores determinantes como el tipode explante y la concentración de citocininas, en la optimización de laorganogénesis directa de pino hibrido. A tal fin, las semillas fueronestratificadas a 4ºC por 3 días para luego extraer ya sea embriones cigóticosmaduros completos; o bien, sus cotiledones, y cultivarlos finalmente en mediosemisólido de Murashige y Skoog (MS) diluido al 50% de su concentraciónoriginal y suplementado con 0,1-0,5-1-3 o 5 mg∙L-1 de bencilaminopurina(BA). Los explantes fueron incubados durante 30 días en condiciones ambientalescontroladas (27±2°C, fotoperiodo 14 hs., luz PAR: 112 μmol∙m−2∙s−1).Se realizaron tres repeticiones evaluándose tasa de regeneración, tasa deoxidación y número de brotes neoformados por explante regenerante. Los datosobtenidos fueron analizados con ANOVA y Test de Tukey (α=0,05). Para talesvariables, se considera que el uso de embriones cigóticos completos constituyela mejor fuente de explantes. El agregado de BA 3 mg∙L-1 al medionutritivo brindó una tasa de regeneración del 93±2,5%, diferenciándose9,77±6,11 brotes por explante regenerante. Independientemente de laconcentración de citocinina utilizada, el 100% de los explantes cotiledonares,presentaron síntomas de ennegrecimiento tisular que afectó negativamente susobrevivencia. Estos resultados indican que el tipo de explante y laconcentración de BA son factores determinantes en la inducción de laorganogénesis directa de Pinus elliottii var. elliottii x Pinuscaribaea var. hondurensis