MAPEO MOLECULAR COMPARATIVO DEL LOCUS QUE CONTROLA LA APOMIXIS ENTRE PASPALUM SIMPLEX Y P. PROCURRENS

HOJSGAARD, D. H.; QUARIN, C.; MARTINEZ, E.; PUPILLI, F.

Corrientes, Corrientes

Jornada; Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas; 2008

MAPEO MOLECULAR COMPARATIVO DEL LOCUS QUE CONTROLA LA APOMIXIS ENTRE PASPALUM SIMPLEX Y P. PROCURRENS Hojsgaard Diego H., Quarin Camilo L., Martínez E.J., Fulvio Pupilli Paspalum simplex y P. procurrens pertenecen al subgénero Anachyris de Paspalum. Un mapa genético de la región genómica de la apomixis ha sido desarrollado para P. simplex. También se desarrolló un mapeo comparativo entre P. simplex, P. malacophyllum y P. notatum. El locus que controla la apomixis (LCA) en P. simplex posee una fuerte represión a la recombinación. Esta falta de recombinación impide la disección genética del locus y el clonamiento posicional de los genes que la controlan. El objetivo de este trabajo fue realizar un mapeo molecular comparativo del LCA entre P. simplex y  P. procurrens, tomando como base la región cromosómica homóloga del mapa de arroz. La población de mapeo se generó por cruzamiento entre una planta tetraploide sexual de P. simplex (C1B2) y una apomíctica de P. procurrens (Q4094). La progenie F1 fue clasificada por su modo de reproducción (apomíctico vs. no-apomíctico) a través de: 1) un marcador SCAR específico de la apomixis, 2) test de progenie usando huellas de ADN y 3) análisis citoembriológicos. Para el mapeo del LCA se emplearon sondas de RFLP de arroz y fragmentos homólogos de Paspalum. Las hibridaciones para detectar polimorfismos informativos fueron realizadas sobre el ADN genómico de cada planta individual, digeridos con las enzimas EcoRI y HindIII. Se obtuvieron 134 híbridos F1 de los cuales 8 fueron clasificados como apomícticos y 126 como no-apomícticos. Se evaluaron 9 sondas del cromosoma 12 de arroz, una del cromosoma 2 y tres marcadores específicos del LCA en P. simplex. Un total de 6 sondas, cuatro del cromosoma 12 de arroz y 2 fragmentos específicos de P. simplex (PsEXS y SCAR-650), mostraron 100% ligamiento en P. procurrens. La sonda C454 ligada en P. simplex, P. malacophylum y P. notatum no mostró ligamiento al LCA en P. procurrens. Sin embargo, la sonda C1069 que mapea en arroz en la misma localización que C454, detectó un fragmento ligado a LCA en P. procurrens con un peso molecular diferente al detectado en P. simplex y P. malacophyllum. Esto indicaría la ocurrencia de una deleción que involucraría a la sonda C454 pero no a C1069. Las sondas de arroz R1759, C996 y C901 detectaron fragmentos ligados a LCA idénticos en las tres especies de Anachyris, pero diferentes respecto a P. notatum. Los resultados obtenidos indican que el LCA no sufrió grandes re-arreglos durante la evolución de P. simplex a P. procurrens; como sí fue detectado previamente con respecto a P. notatum. Los pequeños cambios detectados en P. procurrens con respecto a P. simplex contribuyen a la determinación del tamaño genético del LCA, el cual se encuentra conservado en las especies del subgénero Anachyris de Paspalum. Estos resultados aportan un núcleo básico de marcadores ligados a la apomixis en varias especies de Paspalum estrechamente emparentadas entre sí, los cuales podrán ser utilizados para identificar a los genes responsables de la reproducción apomíctica.