IDENTIFICACION DE GENES CANDIDATOS DE LA APOMIXIS EN RAZAS TETRAPLOIDES DE Paspalum notatum

FELITTI SA, SIENA LA , STEIN J , RODRÍGUEZ MP , PODIO M Y ORTIZ JPA

Sede de Gobierno U.N.R. Rosario

Congreso; X Congreso y XXVIII Reunión Anual Sociedad de Biología de Rosario; 2008

Sociedad Argentina de Fisiologia Vegetal

El término apomixis hace referencia a una forma de reproducción asexual por semillas, que origina progenies genéticamente idénticas a la planta madre. Las razas tetraploides de P. notatum se reproducen mediante apomixis gametofítica de tipo apospórica. Este tipo de reproducción involucra la formación de sacos embrionario no reducidos (apomeiosis), el desarrollo del embrión por partenogénesis y la formación del endosperma en forma autónoma o luego de la fecundación de los núcleos polares (seudogamia). Varios genes han sido asociados a algunos componentes de la apomixis en especies de gramíneas. El objetivo de este trabajo fue aislar secuencias homólogas a los genes SERK (somatic embryogenesis like-kinase), BABYBOON (BB), APOSTART, PKD (protein kinase domain) y EXS, de P. notatum para la realización de estudios funcionales de la apomixis en la especie. Se propuso asimismo aislar y caracterizar las secuencias flanqueantes a marcadores moleculares de AFLP 100% ligados a la aposporía en la especie por estrategias de caminata cromosomal. Se amplificaron fragmentos de los genes serk, bb, apostart, pkd y exs a partir de ADN genómico de P. notatum y/o de una biblioteca no clonada de cDNA (tipo Maratón) mediante la utilización de oligonucleótidos específicos para cada gen. Dichos fragmentos fueron clonados y secuenciados. Para el caso del gen serk se obtuvieron valores de homología entre 34 - 47%. Se diseñó una estrategia de caminata cromosomal basada en el protocolo Genome Walker de Clontech para extender las secuencias de los marcadores moleculares 100% ligadas al locus de la aposporía en la especie. Se generaron 6 bibliotecas genómicas no clonadas a partir de ADN de P. notatum (Q4117). Las mismas fueron utilizadas como molde en reacciones de PCR empleando oligonucleótidos específicos para los marcadores moleculares en estudio. Hasta el momento se lograron extender las secuencias de los marcadores C5, I3 y J7 (250 – 650 pb). Los resultados obtenidos mediante búsquedas BLASTn (NCBI) corresponden a secuencias repetitivas de tipo “transposon:Xilonx3 -LTR retrotransposon” (e=5e-81), a la región promotora del gen acs de banana (e=1e-10), una serina/treonina quinasa de maíz (e=8e-78) y a un gen de Misopates orontium que regula el desarrollo de la flor (e=5e-10). Las secuencias de genes candidatos serán empleadas para estudios genéticos y funcionales de la apomixis en la especie.