Aislamiento y caracterización de bacterias solubilizadoras de fósforo en la rizósfera de yerba mate (Ilex paraguariensis St. Hil.)

COLLAVINO, MÓNICA; SANSBERRO, P. A,; MROGINSKI, L. A.; AGUILAR, ORLANDO M.

Buenos Aires, Argentina

Congreso; IV Congreso Argentino de Microbiología General; 2007

Sociedad Argentina de Microbiología General. (SAMIGE)

Numerosas especies bacterianas rizosféricas son capaces de promover, directa o indirectamente, el crecimiento de las plantas (Beauchamp, 1993). En los últimos años, estas bacterias denominadas comúnmente PGPR (plant growth promoting rhizobacteria) han sido utilizadas como biofertilizantes, aumentando el rendimiento de diversos cultivos de interés agronómico (Kuklinsky-Sobral et al., 2004; Khalid et al., 2004; Barriuso et al., 2005). Consideradas PGPR de acción directa, las bacterias PSB (Phosphorous Solubilizing Bacteria) son capaces de solubilizar las formas no asimilables de fosfatos presentes en el suelo mediante la producción de ácidos orgánicos y la quelación de óxidos de calcio, hierro o aluminio (Rodríguez y Fraga, 1999). Si bien estas bacterias se encuentran distribuidas en diferentes tipos de suelo (Johri et al., 1999; Alikhani et al., 2006; Rivas et al., 2006), su establecimiento y competencia es afectado severamente por estreses tales como salinidad, pH y temperatura (Tilak, 1991; Pal, 1998). Los suelos rojos misioneros, aptos para el cultivo de la yerba mate, son suelos lateríticos, derivados del basalto, permeables, con alto contenido de arcilla y de condiciones estructurales buenas (Ligier et al., 1990). Sin embargo su uso se encuentra condicionado por factores como la acidez (pH 4.5 a 5.5) y la mediana fertilidad, siendo una de las principales limitantes la baja disponibilidad de fosfatos solubles a pesar del alto contenido total de fósforo (Fernández López et al., 2002). En este sistema, es probable que las plantas establezcan asociaciones rizósfericas con microroganismos solubilizadores de fósforo como estrategia para posibilitar su crecimiento. En este trabajo se analizó la diversidad de bacterias PSB presentes en la rizósfera de yerba mate con la finalidad de seleccionar cepas adaptadas a suelos ácidos y capaces de solubilizar eficientemente fosfatos insolubles inorgánicos. Para ello, a partir de muestras de suelo y de la rizósfera de plantas de yerba mate  se estableció una colección de 250 bacterias con actividad solubilizadora seleccionadas en base a su capacidad de clarificar el medio ágar NBRIP por la solubilización del fosfato tricálcico. Los aislamientos PSB fueron analizados molecularmente mediante Rep-PCR utilizando los oligonucleótidos Box1, Rep y Eric encontrando que el análisis Eric-PCR fue más eficiente para agrupar y eliminar la redundancia de los aislamientos. Como resultado, se obtuvieron 48 perfiles Rep representativos la mayoría de ellos rizosféricos (71%). Los perfiles seleccionados fueron caracterizados mediante un análisis cuantitativo de la actividad solubilizadora en medio líquido. Se seleccionaron 24 aislamientos altamente eficientes en la solubilización de fosfato tricalcico, los mismos fueron identificados mediante el análisis de la secuencia del gen ADNr 16S. Las bacterias solubilizadoras aisladas pertenecen a los géneros Enterobacter, Pseudomonas, Burkholderia, Exiguobacterium y Erwinia. Asimismo, se realizaron ensayos de inoculación con los aislamientos Enterobacter sp. en plantines de poroto crecidos en medio con fosfato tricálcico como única fuente de fósforo. Se observó que en las plantas inoculadas con uno de los aislamientos ensayados, R4A, se produce un incremento significativo en el peso seco aéreo y radical, la superficie foliar total y los niveles de fósforo total en hoja en relación con la planta control sin inocular. Estos resultados implican que la presencia de la bacteria R4A en la rizósfera promueve el crecimiento y la capacidad de captación de fósforo en plantas de poroto en medio con bajos niveles de fósforo soluble.