Regeneración de plantas de mandioca por cultivo de meristemas para su empleo en estudios de virología en la Argentina

SCHALLER, SILVIA; ZANINI, ANDREA; RODRÍGUEZ PARDINA, PATRICIA; DI FEO, LILIANA; MROGINSKI, LUIS; RICARDO DANIEL MEDINA

San Miguel de Tucumán, Tucumán, Argentina

Congreso; III Congreso Argentino de Fitopatología; 2014

Asociación Argentina de Fitopatólogos

Con el objeto de iniciar el estudio de las virosis de mandioca (Manihot esculenta) en la Argentina, fue necesario ajustar técnicas diagnósticas y contar con plantas sanas provenientes de cultivo in vitro de meristemas caulinares que oficien de control negativo. Se recolectaron y cultivaron plantas del clon CM3306-4 que presentaban mosaico leve a severo. Los meristemas caulinares (0,2-0,4 mm) derivados de brotes en activo crecimiento, se cultivaron en medio de Murashige y Skoog conteniendo 0,02 mg/L de ácido naftalenacético, 0,05 mg/L de bencilaminopurina y 1 mg/L de ácido giberélico, y se incubaron en cámara con un fotoperíodo de 14 h y 27±2 ºC. A los 60 días, hubo un 25% de regeneración de plantas, en dos ensayos independientes. Luego de la aclimatización ex vitro, sobrevivió una planta asintomática que fue cultivada bajo jaula anti-insectos hasta su análisis. En observaciones al microscopio electrónico de preparados "leaf dips" y decorados, no se observaron viriones. PTA-ELISA y DAS-ELISA resultaron negativas para Cassava common mosaic virus (CsCMV). Lo mismo sucedió en pruebas de DAS-ELISA en las que se empleó anti-Cassava virus X. Además, CsCMV, Cassava frogskin associated virus, Cassava torrado like virus, Cassava polero like virus y Cassava new alphaflexivirus, no fueron detectados molecularmente (RT-PCR). De este modo, fue posible regenerar una planta asintomática, indexada por distintas técnicas, y de gran utilidad para la consecución de los primeros estudios virológicos de mandioca en la Argentina.