EVALUACION DE CAMBIOS EPIGENETICOS EN NUEVOS AUTOTETRAPLOIDES DE PASPALUM NOTATUM

RODRIGUEZ MP; STEIN J; SIENA L.A.; QUARÍN, CL; ORTIZ, JPA

Pergamino, Pcia. de Buenos Aires, Argentina

Congreso; XXXVI Congreso Argentino de Genética; 2007

Sociedad Argentina de Genética

La metilación del ADN es un mecanismo de control epigenético de la expresión génica en muchos eucariotas que se relaciona con la regulación de la transcripción, el silenciamiento génico y el control de la actividad de elementos transponibles. Aún no se conoce claramente que tipo de cambios epigenéticos están asociados a la formación de nuevos autopoliploides. En nuestro laboratorio se dispone de un sistema diploide-tetraploide de P. notatum, representado por los genotipos C4-2x y su contraparte autotetraploide C4-4x, sintetizado por tratamiento con colchicina. El objetivo de este trabajo fue evaluar las alteraciones epigenéticas asociadas a un cambio en el nivel de ploidía en estos genotipos. Se realizaron experimentos con marcadores tipo MSAP (Methylation Sensitive Amplification Polymorphism) empleando los isoesquizómeros HpaII/MspI que exhiben sensibilidad diferencial a la mutilación de citocinas. Los productos de amplificación se resolvieron en geles de poliacrilamida al 5% y se revelaron por tinción con nitrato de plata. Veinticinco combinaciones de cebadores revelaron 1.126 bandas en ambos genotipos. Se identificaron i) loci con secuencias no metiladas en ambos genotipos (77.4%),  ii) loci igualmente metilados (20.1%), iii) loci metilados diferencialmente con respecto al nivel de ploidía (1.6%) y iv) loci no informativos en cuanto a la metilación (0.9%). La presencia de loci del tipo iii indican que se produjeron modificaciones en la metilación del ADN por el cambio en el nivel de ploidía inmediatamente luego de la autopoliploidización en el sistema C4-2x-C4-4x.