Efecto de la composición del medio de cultivo en la germinación asimbiótica de semillas de Oncidium bifolium (Orchidaceae).

DOLCE, N.R.; FLACHSLAND, E.A.; TERADA, G.; MROGINSKI, L.A.; REY, H.Y.

Corrientes

Otro; XXIII Reunión de Comunicaciones Científicas y Técnicas y de Extensión de la Facultad de Ciencias Agrarias. UNNE.; 2014

Facultad de Ciencias Agrarias. UNNE.

Oncidium bifolium Sims es una conocida orquídea epifita nativa de Argentina, cuya distribución es amplia en toda la zona litoral y centro norte del país. Su extracción y venta en viveros y puestos callejeros, sumados al avance de la frontera agrícola en los últimos años, atentan contra su conservación. Para preservar la flora nativa, es necesario desarrollar sistemas de propagación que garanticen la producción de plantas suficientes para satisfacer la creciente demanda. Las semillas de orquídeas carecen por completo de sustancias de reserva capaces de nutrir al embrión durante el proceso germinativo; por ello, en la naturaleza, la germinación sólo es posible mediante la asociación simbiótica con hongos micorrícicos específicos. En este contexto, la técnica de cultivo in vitro de semillas de orquídeas constituye una valiosa herramienta dado que posibilita la germinación asimbiótica de cientos de miles de semillas provenientes de una sola cápsula. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la composición del medio de cultivo en la germinación asimbiótica de semillas de O. bifolium. Se utilizaron semillas provenientes de una cápsula cerrada en madurez fisiológica (100 d posteriores a la polinización manual). La cápsula fue desinfectada superficialmente mediante inmersión en una solución de NaClO 2,5% + TritonÒ X-100 0,1% durante 30 min, seguido de tres enjuagues con agua destilada estéril. A continuación, se extrajeron las semillas bajo condiciones asépticas. La viabilidad de las semillas fue determinada mediante la técnica de tinción con tetrazolio (TTC al 1%). Para evaluar el poder germinativo de las semillas, éstas fueron sembradas en medios nutritivos constituidos por el medio basal de Murashige & Skoog, 1962 (MS) en su formulación completa o reducida al 50 o 25%, solo o suplementado con peptona de soja (PS) 0,5 g/L. En todos los casos, el pH de los medios nutritivos fue ajustado a 5,6 antes del agregado de agar 0,65%. Los cultivos fueron incubados en un cuarto climatizado a 27±2ºC con fotoperíodo de 14 h (intensidad lumínica de 116 mm.m-2.s-1 PPFD). El test de tetrazolio mostró una viabilidad de las semillas del 93%. El poder germinativo de las semillas fue determinado luego de 60 días de la siembra, registrando el porcentaje de germinación (semillas hinchadas que contenían el embrión de color verde claro) y el desarrollo de protocormos (estructura tuberosa que se forma tras la germinación de las semillas de orquídeas y a partir de la cual se desarrolla una planta completa). Ambos procesos ocurrieron en todos los medios nutritivos evaluados, obteniéndose los mayores porcentajes (98% de semillas germinadas y 80% de desarrollo de protocormos) en el medio de cultivo constituido por MS reducido al 50% y suplementado con PS. Los protocormos fueron transferidos a MS fresco suplementado con CA para el subsecuente crecimiento y, al cabo de 150 días de la siembra, se obtuvo el desarrollo completo de las plántulas. Este trabajo describe un protocolo simple y eficiente, adecuado tanto para la propagación a gran escala como para la conservación in vitro de esta orquídea.