IBONE   05434
INSTITUTO DE BOTANICA DEL NORDESTE
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Determinación de las proporciones relativas de secuencias ccgg metiladas a los niveles diploide y tetraploide de paspalum notatum
Autor/es:
RODRIGUEZ MP; STEIN, J; SIENA LA; QUARIN CL; ORTIZ JPA
Lugar:
San Luís, Argentina
Reunión:
Congreso; XXXV Congreso Argentino de Genética; 2006
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Genética
Resumen:
La metilación del ADN es una modificación covalente post-replicativa que se relaciona con la regulación de la trascripción, el silenciamiento génico y el control de la actividad de elementos transponibles. Con el objetivo de determinar las proporciones relativas de secuencias CCGG metiladas en el genoma de P. notatum a los niveles 2x y 4x se realizaron experimentos con marcadores tipo MSAP (Methylation Sensitive Amplification Polymorphism) empleando las enzimas EcoRI,  HpaII y MspI (las 2 últimas reconocen la misma secuencia blanco pero exhiben sensibilidad diferencial a la metilación de citocinas). Se emplearon 7 combinaciones de cebadores sobre el ADN de 4 genotipos diploides (Tifton 9, Q4175, Cayastá 3 y Cayastá 6) y 4 tetraploides (Q4188, Q4117, N160 y Claudina) de la especie. Los productos de amplificación se resolvieron en geles de poliacrilamida al 5% y se revelaron por tinción con nitrato de plata. En promedio se obtuvieron un total de 342 y 472 bandas por combinación de cebadores para los genotipos diploides y tetraploides, respectivamente. La comparación de los patrones de bandeo de cada una de las muestras digeridas con los pares de enzimas EcoRI/HpaII y EcoRI/MspI mostraron entre un 21-34% y 13-31% de bandas polimórficas en los diploides y tetraploides, respectivamente, debido a la metilación diferencial de residuos de citocinas en la secuencia blanco CCGG. Estos valores indican que no existen diferencias significativas en las proporciones relativas de secuencias CCGG metiladas entre ambos niveles de ploidía.