Conservación in vitro de semillas de especies de Ilex (Aquifoliaceae)

DOLCE, N.R.; GONZALO, A.G.; MROGINSKI, L.A. Y REY, H.Y.

Corrientes

Otro; XXIII Reunión de Comunicaciones Científicas y Técnicas y de Extensión de la Facultad de Ciencias Agrarias. UNNE.; 2012

Facultad de Ciencias Agrarias. UNNE.

Los bancos convencionales de semillas constituyen uno de los métodos más convenientes para la conservación de germoplasma ex situ, porque permiten almacenar gran diversidad genética en forma económica y práctica. Sin embargo, esta metodología de conservación no es aplicable a especies del género Ilex, cuyas semillas pierden viabilidad rápidamente al ser almacenadas con bajos contenidos de agua. Las mismas presentan mayor longevidad cuando se almacenan frutos intactos a 4°C contenidos en bolsas de polietileno cerradas, manteniendo así un contenido de agua elevado durante todo el período de almacenamiento. Bajo tales condiciones, se presentan inconvenientes como ser la germinación durante el almacenamiento y la mayor susceptibilidad de las semillas al ataque de patógenos. Estos procesos acortan drásticamente el período de almacenamiento de las semillas y dificultan la conservación de germoplasma de estas especies. Una alternativa interesante para la conservación de semillas hidratadas es el uso de técnicas de cultivo in vitro, lo cual permite controlar algunos inconvenientes asociados al almacenamiento de este tipo de material. El objetivo de este trabajo fue evaluar la posibilidad de conservar in vitro semillas de tres especies del género Ilex bajo condiciones de crecimiento reducido inducido por ácido abscísico (ABA) y temperaturas bajas. Se trabajó con semillas provenientes de frutos maduros de I. dumosa, I. paraguariensis e I. pseudoboxus, las cuales fueron desinfectadas y transferidas asépticamente a tubos de vidrio de 11 cm3 de capacidad conteniendo 5 mL de medio de cultivo semisólido (agar 0,65%) constituido por el medio basal de Murashige y Skoog (1962) cuya concentración salina fue reducida cuatro veces, conteniendo 3% de sacarosa y suplementado con 0, 5, 10 o 20 mg l-1 de ABA. La incubación de los explantes se realizó en una cámara climatizada a 27±2ºC o 4±2ºC en oscuridad permanente. La viabilidad de las semillas conservadas fue evaluada luego de 6 y 12 meses de almacenamiento, subcultivándolas a un medio de germinación y comprobando su capacidad de regeneración de plantas en comparación con la de semillas provenientes de frutos recién cosechados. Los resultados obtenidos en esta investigación demuestran que la temperatura de almacenamiento es un factor clave para la supervivencia de las semillas, siendo que en las tres especies estudiadas las semillas mantenidas a 4°C presentaron mayor poder germinativo que aquellas almacenadas a 27°C, en los dos momentos de evaluación. Asimismo, se observa que el ABA no mejoró la conservación de las semillas. Si bien en una de las especies el ABA jugó un rol importante para evitar la germinación de las semillas durante el almacenamiento, no mostró un efecto positivo sobre la capacidad de germinación de las mismas posterior al almacenamiento. En conclusión, las semillas hidratadas de las tres especies de Ilex estudiadas pueden ser conservadas in vitro bajo condiciones de crecimiento reducido inducido por temperaturas bajas, manteniendo una viabilidad moderada a alta, al cabo de un año de almacenamiento. Esta metodología constituye una alternativa interesante para la conservación a mediano plazo de semillas de especies de Ilex.