Aislamiento y caracterización funcional del gen SERK (Somatic Embryogenesis Receptor Like-Kinase) de Paspalum notatum

PODIO, MARICEL; FELITTI S A; SEIJO, J G; GONZALEZ, AM; SIENA, L A; ORTIZ, JUAN PABLO A.

Corrientes

Congreso; XL Congreso Argentino de Genética; 2011

Paspalum notatum es una especie rizomatosa perenne que se distribuye desde México hasta Argentina. Las razas tetraploides se reproducen por apomixis gametofítica de tipo apospórica. Este tipo de reproducción involucra la formación de sacos embrionarios no reducidos (aposporía), el desarrollo partenogenético del embrión y la formación del endospermo por pseudogamia. El gen SERK  juega un rol fundamental en la embriogénesis somática de varias angiospermas y fue asociado a la apomixis en Poa pratensis. Se postula que expresión del mismo en células de la nucela sería uno de los disparadores del desarrollo de los sacos embrionarios de tipo apospórico. El objetivo del presente trabajo fue aislar y caracterizar los patrones de expresión del gen SERK de P. notatum. Se diseñaron oligonucleótidos sobre las regiones conservadas y se ensayaron sobre los genotipos Q4188 (sexual) y Q4117 (apomíctico). Los fragmentos obtenidos fueron extendidos por caminata cromosomal sobre bibliotecas genómicas no clonadas del genotipo apomíctico Q4117. Inicialmente se amplificó un fragmento de 200 pb homólogo al exón 9 de PpSerk, a partir del cual se aislaron 2 secuencias: PnSerk1 (1750 pb) y PnSerk2 (2050 pb) con alta similitud a los genes PpSerk-1 y ZmSerk-2, respectivamente. Estudios de expresión por PCR en tiempo real en inflorescencias en diferentes estadios del desarrollo mostraron que PnSerk presenta mayores niveles de expresión en antesis. No se detectaron diferencias significativas entre los genotipos (sexual y apomíctico). Experimentos de hibridización in situ de tejido, corroboraron la expresión de PnSerk en tejido ovárico del genotipo apomíctico en antesis.