Crioconservación de semillas de Ilex dumosa e I. pseudoboxus utilizando la técnica de Desecación

GONZALO, A.G.; DOLCE, N.R.; MROGINSKI, L.A. Y REY, H.Y.

Resistencia

Otro; Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2012 de la Universidad Nacional del Nordeste; 2012

UNNE. Secretaría General de Ciencia y Técnica.

En general, los bancos de semillas constituyen uno de los métodos más convenientes para la conservación de germoplasma ex situ, porque permiten almacenar una gran diversidad genética en forma económica y práctica. Sin embargo, esta metodología de conservación solo es aplicable a especies cuyas semillas presentan un comportamiento ortodoxo es decir, cuya viabilidad no se altera en mayor grado luego de un largo período de almacenamiento a temperaturas bajas y con un contenido de agua bajo. Según fue demostrado previamente, las semillas de especies de Ilex presentan un comportamiento intermedio entre las ortodoxas y las recalcitrantes, ya que si bien toleran la desecación a niveles similares a los de las semillas ortodoxas, su viabilidad desciende rápidamente durante el almacenamiento. Para la conservación a largo plazo de estas semillas, lo cual es conveniente para el establecimiento de un banco de germoplasma, una opción interesante sería la crioconservación, que consiste en su almacenamiento a la temperatura ultrabaja del nitrógeno líquido (NL, -196ºC). En esta situación se logra la detención de la mayoría de los procesos metabólicos y con ello el bloqueo de los mecanismos fisiológicos responsables del envejecimiento de las semillas y, por lo tanto, la prolongación indefinida del período de conservación. El objetivo de este trabajo fue establecer procedimientos que permitan la crioconservación de germoplasma de especies del género Ilex utilizando la técnica de Desecación. Se trabajó con semillas provenientes de frutos maduros de I. dumosa e I. pseudoboxus. Las mismas fueron sometidas a 16 tratamientos, con el objeto de determinar el efecto del periodo de deshidratación con Silicagel (0 a 14 h) sobre la sobrevivencia de las semillas luego de ser llevadas o no a NL. En este estudio, la utilización de la técnica de Desecación posibilitó la obtención de plantas de las dos especies de Ilex evaluadas luego del cultivo in vitro de las semillas deshidratadas y crioconservadas. La exposición al NL fue letal para las semillas cuando éstas fueron crioconservadas sin deshidratación previa, pero a medida que se extendió el período de deshidratación, el contenido de agua de las semillas decreció y la tasa de supervivencia se incrementó. En ambas especies, una vez que se optimizó el contenido de agua de las muestras, la crioconservación no afectó negativamente la germinación de las semillas. Para I. dumosa el mejor tratamiento consistió en deshidratar las semillas durante 8 h (contenidos de agua cercanos al 7%) y posteriormente llevarlos a NL, obteniendo de esta manera un porcentaje de germinación de 66%. Para I. pseudoboxus, el rango óptimo de humedad fue más amplio, obteniéndose una elevada supervivencia (del nivel de los tratamientos controles) cuando las semillas fueron deshidratadas durante períodos de 10-14 h (contenidos de agua entre 9 y 7%) previo a la crioconservación. Esta metodología se destaca por su sencillez y bajo costo, debido a que no requiere el uso de crioprotectores ni equipos sofisticados para el enfriamiento, permitiendo que la misma sea repetible en cualquier centro de conservación de germoplasma.