´´Análisis funcional de la sobreexpresión del gen codificante de arginina descarboxilasa en plantas de Lotus tenuis sujetas a estrés osmótico´´.

FABIANA ESPASANDIN, OSCAR RUIZ, PEDRO SANSBERRO.

Chascomus. Buenos Aires.

Taller; V Taller Interdisciplinaro sobre Aspectos Genéticos, Moleculares y Ecofisiológicos de Lotus spp. y sus Simbiontes; 2010

Intech. Chascomus.

Con el propósito de indagar el rol que tendrían las poliaminas en la defensa de la planta ante estrés osmótico, se emplearon líneas transgénicas portadoras ya sea del gen de la arginina descarboxilasa (ADC) o de GUS, bajo el control del promotor inducible RD29A, obtenidas previamente. Los experimentos para producir estrés hídrico, se realizaron con plantas que crecieron en macetas bajo condiciones ambientales controladas. Tanto las líneas transgénicas como aquellas no transformadas (nt) fueron irrigadas (suelo= -0.04 MPa) y cubiertas con papel impermeable para evitar la evaporación, manteniéndose esta situación hasta que suelo antes del amanecer, descendiera a –2MPa. El estrés salino se realizó en las mismas condiciones que el estrés hídrico y se inició con riego de una solución de 50 mM NaCl aumentando progresivamente hasta llegar a 300 mM. A partir de muestras obtenidas en ambas situaciones se realizaron determinaciones de actividad enzimática, prolina y ajuste osmótico complementándose con la cuantificación del intercambio gaseoso y parámetros de crecimiento. Pudo observarse que el gen de interés se expresa en parte aérea (tallos y hojas) en respuesta al factor adverso correlacionándose con un pico de la actividad enzimática (29 y 38 veces superior a la planta nt estresada bajo condiciones de estrés salino e hídrico, respectivamente). Al mismo tiempo, se detectó un marcado incremento en el contenido de prolina cuya magnitud fue de 4 y 11 veces mayor en la línea ADC respecto al control nt (p= 0.0006). El ajuste osmótico varió entre -0.18 y -1.86 MPa para los genotipos nt y ADC, respectivamente (p= 0.013); manifestándose un mayor CRA en brotes de la planta transgénica. Si bien, no se observaron diferencias significativas, pudo constatarse una menor transpiración resultante.