ESTRATEGIAS PARA EL BIOCONTROL DE HONGOS FITOPATOGENOS MEDIANTE EL USO DE METABOLITOS SECUNDARIOS Y NANOPARTICULAS METALICAS BIOGENICAS A PARTIR DE Trichoderma harzianum

ALVAREZ VERA A ; PARISE ALEJANDRO ; TORRES NICOLINI ANDRES ; CONSOLO VF

BUENOS AIRES

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología - CAM 2019. V Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos - V CAMA. V Congreso Latinoamericano de Microbiología de Medicamentos y Cosméticos - CLAMME 2019:; 2019

ASOCIACION ARGENTINA DE MICROBIOLOGIA

Introducción y Objetivos: Los hongos del género Trichoderma son microorganismos de suelo que secaracterizan por ser agentes de biocontrol, promover el crecimiento vegetal, secretar enzimas y metabolitossecundarios. Recientemente se ha descripto que algunas cepas reducen metales generando nanopartículas.Tanto los metabolitos secundarios como las nanopartículas poseen propiedades químicas y biológicas de interéspara aplicaciones médicas, farmacéuticas o agrícolas. La búsqueda de alternativas innovadoras para el controlde microorganismos fitopapatógenos es un área que debe ser explorada. El objetivo de este trabajo fue obtenery caracterizar metabolitos secundarios y nanopartículas a partir de una cepa nativa de Trichoderma y evaluarsu capacidad de biocontrol.Materiales y Métodos: Se cultivó el hongo durante 7 días a 24 ºC en medio líquido y con agitación constante.Posteriormente, se separó la biomasa fúngica y se trabajó con el caldo de cultivo. Para la obtención demetabolitos, el filtrado del cultivo se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se desecaron conNa2SO4 y se evaporaron en rotavapor bajo presión reducida a 40 ºC. El residuo obtenido se resuspendió en etilacetato: metanol (10: 1 v/ v) y fue sometido a cromatografía de capa fina en sílica gel utilizando fases móvilesde diferente polaridad (hexano, hexano: etil acetato 1:1 y metanol: acetato 10:1). Los compuestos serevelaron por radiación UV. Para la síntesis de nanopartículas, la biomasa fúngica (20 g) fue lavada ytransferida a un erlenmeyer con agua estéril durante 24 h a 24 °C con agitación. Se separó la biomasa porfiltración y se recogió el filtrado. Las nanopartículas se sintetizaron agitando soluciones de A-gNO-3 (1 y 3 mM)con el filtrado en oscuridad a 40 °C y pHs entre 6 y 11. Las nanopartículas formadas se separaron porcentrifugación. Tanto los extractos como las nanopartículas secas se utilizaron para evaluar su efecto debiocontrol sobre los fitopatógenos Alternaria, Cercospora, Dreschleray Pyricularia sp. Para ello éstos hongosfueron crecidos en medio PDA suplementado con 0, 5 1, 5 y 10 % de los extractos y las nanopartículas enexperimentos independientes.Resultados: El fraccionamiento cromatográfico de los extractos mostró una mezcla de compuestos que deberáser indentificado. La síntesis óptima de nanopartículas fue con solución 3 mM de A-gNO-3y pH 11,observándose su formación a partir de los 30 min de incubación. El tamaño medio de partículas fue de 150 -200 nm. El extracto orgánico incorporado al medio de cultivo en concentraciones del 5-10% inhibió elcrecimiento los cuatro patógenos ensayados entre 10-30%. De la misma manera, se redujo el crecimiento deéstos hongos entre 20-30% en el medio de cultivo suplementado con 1% de nanopartículas. Ninguno de loscompuestos mostró toxicidad para la cepa de Trichoderma.Conclusiones: Estos resultados apuntan al desarrollo de formulaciones de agroinsumos tecnológicamentenovedosas para el control de enfermedades fúngicas.