Identificación de cepas de Paenibacillus larvae mediante técnica de Espectroscopía Infrarroja con transformada de Fourier (FT-IR)

ÁLVAREZ, B. S.; MARTUCCI, J.; DI MEGLIO, L.G.; FASCE, D.; GENDE, L. B.

Mar del Plata

Workshop; 1° workshop latinoamericano en sanidad apícola; 2018

Centro de Investigación en abejas sociales (UNMdP)

La loque americana es una de las patologías más graves que afecta a las colonias de abejas (Apis mellifera), es una enfermedad bacteriana cuyo agente causal es Paenibacillus larvae. El espectro infrarrojo de un microorganismo es considerado una verdadera huella dactilar, corresponde al resultado de la absorción de todos los modos vibracionales de las moléculas que componen la célula (ADN, proteínas, lípidos, hidratos de carbono, componentes de membrana y pared celular). La espectroscopia FT-IR puede ser aplicada a todos los grupos de bacterias y clasificarlas a nivel de género, especie y aún entre cepas y serotipos. Esta técnica es rápida, requiere escasa biomasa, fácil de implementar y no necesita de una preselección de cepas por otros criterios taxonómicos. El objetivo del presente trabajo fue estudiar 7 aislamientos de P. larvae (genotipo ERIC I) mediante espectroscopía FT-IR, utilizando dos enterobacterias extraídas del intestino medio de A. mellifera, como controles (todas previamente liofilizadas). La agrupación bacteriana se logró mediante el filtrado de los espectros (derivada primera) y la selección de cinco ventanas espectrales, considerando su contenido específico de información y su poder de discriminación. El análisis de conglomerados arrojó dendrogramas ampliamente equiparados con los esquemas de clasificación taxonómica convencionales. Cada nodo definió un conjunto, el cual agrupó las cepas bacterianas que más se asemejaron en base a sus espectros, agrupando todas las de P. larvae y diferenciándolas de las enterobacterias. Teniendo en cuenta el eje de ordenadas, donde se estableció la disimilitud entre los grupos (0% similares, 1% disimiles), el grupo de cepas de P. larvae resulto homogéneo en todas las ventanas espectrales. Cabe destacar que el presente ensayo representa la primer identificación de P. larvae mediante espectroscopía FT-IR.