INIBIOLP   05426
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOQUIMICAS DE LA PLATA "PROF. DR. RODOLFO R. BRENNER"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
EXPRESION DE VECTORES BICISTRONICOS DERIVADOS DE UN VIRUS ADENOASOCIADO : ENSAYOS IN VITRO E IN VIVO
Autor/es:
RODRÍGUEZ SS; SCHWERDT JI; GOYA RG
Lugar:
Santa Fe
Reunión:
Jornada; XVIII XVI Jornadas de jóvenes investigadores de la Asociación de Universidades del Grupo Montevideo; 2010
Institución organizadora:
Asociación de Universidades del Grupo Montevideo-Universidad Nacional del Litoral
Resumen:
Los ácidos nucleicos tienen diversas aplicaciones terapéuticas, desde la corrección de defectos genéticos, el tratamiento de enfermedades crónicas hasta su utilización como coadyuvantes para la vacunación. Entre los vehículos mas utilizados para la transferencia génica en ensayos clínicos se encuentran los vectores recombinantes derivados de una amplia variedad de virus tales como adenovirus, virus adenoasociados y lentivirus. Los vectores recombinantes derivados de virus adenoasociados (rAAVs) han sido muy utilizados para la transferencia de genes por no ser patógenos en humanos, poseer la capacidad de infectar tanto células en división como quiescentes y mantener la expresión de genes por largos plazos. En el presente trabajo evaluamos la expresión in vitro de los transgenes de dos rAAVs bicistrónicos. Uno de ellos portador del transgén del factor de crecimiento insulino simil tipo I (IGF-I) seguido de un sitio interno de entrada al ribosoma (IRES) y el transgén de la proteína fluorescente roja (DsRed); y otro que solo contiene el sitio IRES y el transgén de la DsRed. Con ambos rAAVs demostramos que la expresión del transgén de la DsRed en células HEK 293 se mantiene al menos por 5 días. Además, con el rAAV portador del transgén del IGF-I se obtuvo una expresión del mismo significativamente superior al expresado de manera endógena por estas células. En un experimento in vivo, en el que se inyectaron los rAAVs en el hipotálamo de ratas, la duración de la expresión del transgén de la DsRed fue de al menos  de 75 días,  Los resultados obtenidos nos permiten concluir que estos vectores podrían ser utilizados para la implementación de terapia génica para IGF-I en hipotálamo de ratas por periodos largos Como también estos rAAVs expresan tanto in vitro como in vivo el transgén de una proteína reportera resultan una herramienta tecnológica apropiada para lograr la fácil detección de la sobreexpresión del IGF-I en las células transducidas por ellos.