SÍNTESIS DE PÉPTIDOS DERIVADOS DE ALFA HEMOLISINA DE E. COLI PARA LA CONSTRUCCIÓN DE UNA INMUNOTOXINA.

HERLAX V; GUZMÁN F; CANÉ L

Workshop; WORKSHOP: PÉPTIDOS TERAPÉUTICOS; 2019

Existe un amplio interés en la aplicación de péptidos sintéticos como agentes terapéuticos. En los últimos años se han estado desarrollando inmunotoxinas (ITs) para el tratamiento del cáncer. Las ITs son quimeras compuestas por un ligando de unión a la célula, como un anticuerpo monoclonal (mAb) o un factor de crecimiento acoplado a una toxina o porción de la misma; de manera tal que se dirige específicamente la actividad citotóxica de la toxina contra las células cancerosas al utilizar mAb contra antígenos que se sobreexpresan en la membrana de estas células. Dada nuestra experiencia en el estudio de la estructura y función de la toxina Alfa Hemolisina de Escherichia coli (HlyA), el objetivo del trabajo fue sintetizar péptidos derivados de la toxina que mantengan actividad para construir una IT. A partir de datos experimentales y predicciones estructurales, se sintetizaron cuatro péptidos derivados del dominio de inserción de HlyA en membranas. Los péptidos fueron sintetizados por el método de síntesis peptídica en fase sólida (Estrategia Fmoc) y purificados por HPLC (columna C-18). La masa molecular se determinó por espectrometría de masas y la estructura peptídica por dicroísmo circular. La actividad hemolítica de los péptidos se midió usando eritrocitos humanos y la citotoxicidad mediante el método de reducción de MTT en la línea celular tumoral mamaria MCF-7. Los resultados describen a uno de los péptidos como hemolítico y citotóxico, con lo cual planteamos la construcción de la IT con ese péptido acoplado a un anticuerpo anti-TROP 2. TROP 2 es una glicoproteína que se sobreexpresa en la membrana de células cancerosas mamarias.